Dapper（Dpr）蛋白家族中不同的成员:Dapper1（Dpr1）和Dapper2（Dpr2）蛋白,在先前爪蟾的研究以及我们克隆得到的斑马鱼Dapper2蛋白在斑马鱼中的研究中已经发现,它们能够分别调控Wnt和TGFβ信号通路。为了能够对Dapper这一家族蛋白在哺乳动物中的功能做进一步的研究,我们克隆了斑马鱼Dapper2蛋白在小鼠中的同源蛋白mDpr2并对其在调控TGFβ信号通路中的作用进行了研究。我们的研究发现,和斑马鱼zDpr2的功能相类似,在哺乳动物细胞中过量表达mDpr2蛋白能够诱导TGFβI型受体的降解,从而抑制TGFβ诱导的下游报告基因的表达。特异性抑制内源mDpr2的RNA干扰也能上调TGFβ报告基因的表达。这些研究结果揭示了Dpr2作为进化上保守的TGFβ逆调控因子而存在。 Wnt信号在胚胎发育和癌症发生中起很重要的作用,爪蟾中的Dpr蛋白作为Dishevelled（Dvl）的结合蛋白被发现,并证实在Wnt信号中起作用。但其哺乳动物（人与小鼠）的同源蛋白Dpr1,是否也起到相类似的作用,是否如Dpr2蛋白一样能够调控TGFβ信号,都不得而知。因此,我们克隆得到了人和小鼠的Dapper1基因并发现,与Dpr2蛋白不同,哺乳动物的Dpr1基因能够明显的抑制经典Wnt信号通路和非经典的Wnt信号通路。通过相互作用区段的分析,我们鉴定了Dpr1蛋白和Dvl2蛋白的相互作用区段主要是通过Dpr1蛋白的C端区域结合Dvl2蛋白的DEP结构区域。利用Wnt信号的报告基因,我们发现,Dpr1对Wnt信号呈现的抑制作用需要该蛋白各个区段一起的参与,单独表达Dpr1的C端225个氨基酸区段对Wnt报告基因表现出来的激活证明了该区段是Dpr1的显形失活区域。深入的研究我们发现,Dpr1蛋白能够通过结合Dvl2蛋白诱导其通过溶酶体降解。特异性抑制内源Dpr1的RNA干扰不仅能够上调Wnt信号,而且能够增加内源Dvl2的蛋白表达。从而,我们的工作也证实了Dpr1是进化上保守的Wnt信号的抑制因子。 为了深入地研究Dapper家族蛋白的生物学功能,本课题克隆了Dpr1/Dpr2在酵母中表达的诱饵蛋白,利用人胎儿脑文库cDNA完成了酵母双杂交,为以后的研究奠定了一定的基础。