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目的:采用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导心肌成纤维细胞(CFs)建立增殖模型，探讨槲皮素对TNF-α诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖及P38MAPK、HMGB1表达的影响，探索槲皮素抑制心肌纤维化的分子机制，为槲皮素逆转心室重构及其开发利用提供实验依据。 方法:1.原代心肌成纤维细胞的培养和鉴定:通过胰蛋白酶消化法，利用差速贴壁法获得较纯化的心肌成纤维细胞，用光学显微镜和免疫荧光法鉴定细胞。2.检测方法:应用MTT法检测心肌成纤维细胞的增殖，采用Western Blot法测定P38MAPK、HMGB1蛋白的表达。3.实验分组:根据药物浓度的不同，将第3或4代心肌成纤维细胞用于实验，并将实验分为三个部分:第一:槲皮素对基础状态下的心肌成纤维细胞的影响，分为五组:空白对照组以及不同浓度的槲皮素组(25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L);第二:探索TNF-α诱导心肌成纤维细胞增殖的浓度范围及作用时间，根据不同浓度的TNF-α分为空白对照组、5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml、160ng/ml、320ng/ml、640ng/ml组作用8小时，找到浓度范围后再作用不同的时间0h、4h、8h、16h、32h;第三:观察槲皮素对TNF-α诱导的心肌成纤维细胞增殖及P38MAPK、HMGB1表达的影响，分为6组:空白对照组、TNF-α组、不同浓度的槲皮素（25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）+TNF-α组、P38MAPK抑制剂(SB203580)+TNF-α组。 结果:1.原代培养细胞经过光学显微镜和免疫荧光法鉴定为心肌成纤维细胞，纯度在98％以上。2.槲皮素对基础状态下的心肌成纤维细胞干预24h后并不影响心肌成纤维细胞的增殖，结果显示槲皮素各浓度组(25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L)与空白对照组的OD值比较，P＞0.05，未见显著的统计学差异。3.TNF-α各浓度组与对照组比较，其中5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml浓度组OD值明显高于对照组，P＜0.05，差异有统计学意义。TNF-α不同时间组与0h组比较，4h、8h组的OD值高于0h组，P＜0.05，差异有统计学意义。4.槲皮素干预TNF-α诱导的心肌成纤维细胞24h后，各浓度组OD值与TNF-α组相比较，P＜0.05，差异具有统计学意义，随着槲皮素浓度的增加，CFs的OD值越小;槲皮素各浓度组之间比较，P＜0.05，差异均有统计学意义。5.TNF-α组P38MAPK、HMGB1的蛋白表达明显高于对照组、槲皮素各浓度组以及SB203580组(P＜0.05)，而槲皮素各浓度组(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)，随浓度的增加，P38MAPK、HMGB1的蛋白表达逐渐减弱，且组间比较均有差异(P＜0.05)，SB203580组P38MAPK、HMGB1的蛋白表达也明显弱于TNF-α组。 结论:1.TNF-α在一定浓度、时间范围内能刺激心肌成纤维细胞增殖，成功建立CFs增殖模型。2.槲皮素对基础状态下CFs增殖无明显地抑制作用，而对应激状态下的CFs增殖有一定地抑制效应。3.槲皮素可能是通过P38MAPK途径抑制HMGB1的表达，参与抑制心肌成纤维细胞的增殖。