目的：本次试验以大鼠H4-ⅡE细胞作为研究对象，采用含有不同浓度乙醇之细胞培养液进行细胞培养，观察乙醇对H4-ⅡE细胞PPAR-α、AMPK-α1及细胞凋亡的影响。　　方法：1、大鼠H4-ⅡE细胞以适量浓度接种于培养瓶中，加入DMEM培养液（含10％胎牛血清、4500mg/L D-葡萄糖、584mg/L L-谷氨酰胺、3700mg/L Na2CO3、青霉素100u/ml、链霉素100μg/ml，pH值7.0～7.4。）置于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养。每3～5日传代1次，视细胞密度及后续操作需求以1:4～1:12比例传代。分设对照组和实验组，实验组在上述培养液中分别加入乙醇并调定浓度至0.5mol/L、1.0mol/L、1.5mol/L。在培养12小时末进行凋亡检测，在培养12h、24h、48h末进行HE染色和免疫组化染色。2、应用倒置显微镜、HE染色进行形态学观察；免疫组化染色观察PPARα、AMPKα1在各组细胞内的表达；流式细胞术、AnnexinⅤ-FITC/PI双染色、TUNEL染色检测各组细胞凋亡。　　结果：1、形态学：①倒置显微镜：对照组细胞为梭形，排列密集，体积较大，正常贴壁，胞膜完整，胞质丰富，饱满透亮，分布均匀，核仁大小不一，可见核分裂相；乙醇组细胞数量减少明显，部分明显变圆，凋亡明显增多。②HE染色：对照组细胞呈梭形，细胞排列致密，细胞之间空隙少，细胞体积大，胞浆丰富，胞核染色明显，胞核中可见多个核仁，可有核分裂相；乙醇组细胞排列明显疏松，部分细胞明显变圆，胞浆浓缩，视野中凋亡细胞、颗粒明显比对照组低浓度乙醇组增多。2、流式细胞术：乙醇干预组H4-ⅡE细胞正常活细胞比例较对照组减少（P＜0.05），早期凋亡细胞比例增多（P＜0.05），晚期凋亡细胞及死亡细胞比例增多（P＜0.05）。3、AnnexinⅤ-FITC/PI双染色：对照组：使用 FITC滤镜（蓝光）观察，极少数细胞可见红色荧光，使用Rhodamine滤镜（绿光）观察，少数细胞可见绿色荧光；乙醇组细胞：使用FITC滤镜观察，可见较多红色荧光，使用Rhodamine滤镜观察，可见较多绿色荧光，视野中细胞皱缩明显，可见较多细胞碎片。4、TUNEL法检测细胞凋亡：对照组细胞呈梭形，大多数细胞呈无色透明，个别细胞胞核呈蓝色；乙醇组细胞排列明显疏松，部分细胞明显变圆，胞核被染色之细胞数量较低浓度乙醇组明显增多（P＜0.05）。5、免疫组化染色：①乙醇对大鼠H4-ⅡE细胞PPAR-α表达的影响：与对照组相比，0.5M乙醇处理12h后 H4-ⅡE细胞 PPAR-α表达无显著改变（P＞0.05），其他乙醇组 H4-ⅡE细胞 PPAR-α表达明显减少（P＜0.05）；②乙醇对大鼠 H4-ⅡE细胞 AMPK-α1表达的影响：与对照组相比，0.5M乙醇处理12h后H4-ⅡE细胞AMPK-α1表达无显著改变（P＞0.05），其他乙醇组 H4-ⅡE细胞 AMPK-α1表达明显减少（P＜0.05）。　　结论：1、乙醇减少肝细胞PPAR-α的表达；2、乙醇减少肝细胞AMPKα1的表达；3、乙醇诱导肝细胞凋亡与PPAR-α的表达下调有关。