【摘 要】
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本实验以苹果(Malus domestica Borkh. cv. Red Starking)果实及葡萄(Vitis vinifera L. ×V. lubrusca L. cv. Kyoho)果实为试材,利用胶体金免疫电镜技术和Western印迹方法研究外
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本实验以苹果(Malus domestica Borkh. cv. Red Starking)果实及葡萄(Vitis vinifera L. ×V. lubrusca L. cv. Kyoho)果实为试材,利用胶体金免疫电镜技术和Western印迹方法研究外源ABA对苹果、葡萄果实内PM H+-ATPase、Ca2+-ATPase和V-ATPase表达量的影响。结果表明,PM H+-ATPase分子量为99.7 KDa,定位于质膜,少量位于囊泡膜,在苹果果实发育前期含量最高,且表达受ABA诱导。Ca2+-ATPase广泛定位于生物膜系统,ABA处理使其总含量升高,在果实发育中期有一个高峰,且后期表达量多于前期表达量。抗体在苹果果实微粒体中杂交得到一条121.1 KDa的蛋白条带,而在葡萄果实微粒体中分别得到100.6 KDa和112.3 KDa的蛋白条带,且两条带变化规律相似。V-ATPase主要位于液泡膜、质膜和囊泡膜,在果实发育中期含量最低,在生长发育过程中,各亚基含量呈非一致变化,ABA主要诱导了催化亚基的合成与表达,并表现为在质膜上明显增强(含珠光壁的筛管分子除外)。在苹果果实中,62.2 KDa的结合亚基和71.3 KDa的催化亚基的含量分别于果实发育前期和后期达到高峰,而葡萄果实中58.1 KDa的结合亚基和75.4 KDa的催化亚基的含量变化恰与苹果果实中相应亚基的变化相反,即随葡萄果实成熟进程,结合亚基的数量逐渐上升,催化亚基的数量逐渐下降。外源ABA处理能不同程度地增加以上三种酶的酶量。 总之,PM H+-ATPase、Ca2+-ATPase的含量分别在果实发育的前期、中期达到最大值,而V-ATPase在果实发育中期含量最低,外源ABA处理诱导了以上各类ATPase的表达。
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