产CTX-M型ESBLs耐多药大肠埃希菌的临床分布探讨

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目的:了解泸州地区产超广谱β内酰胺酶(extend-spectrumβ-lactamases,ESBLs)大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)对常见抗菌药物的药物敏感情况,探讨CTX-M型耐多药ESBLs大肠埃希菌的临床分布情况。方法:1.药敏纸片法:测定本地区153株临床分离菌株对常见的β内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类抗生素的耐药性。用美国全国临床检验标准委员会(the National Committee for clinical Laboratory Standards,NCCLS)的推荐标准,筛选ESBLs阳性大肠埃希菌。2.PCR技术检测blaCTX-M:PCR反应体系共25ul,其中模板10ul,引物1、引物2各1ul,2×Taq PCR MasterMix 12.5ul,ddH2O0.5ul。PCR反应循环参数为:94℃预变性3min;94℃变性30s;55℃退火30s;72℃延伸30s;循环变性、退火和延伸的过程30次;再次72℃延伸5min。PCR反应产物送上海生工进行测序。结果:1.药敏实验结果:临床分离的153株大肠埃希菌对β内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类抗生素有不同程度耐药;耐药模式为全敏12株(7.84%),单耐药32株(20.92%),双耐药43株(28.10%),耐多药66株(43.14%)。ESBLs阳性菌株92株(60.13%),耐药模式为单耐药3株(3.26%),双耐药30株(32.61%),耐多药59株(64.13%)。2.基因检测结果:92株ESBLs阳性大肠埃希菌中86株菌株检出blaCTX-M,blaCTX-M-1检出57株(61.91%),blaCTX-M-9检出54株(58.70%),blaCTX-M-8检出9株(9.78%),未检出blaCTX-M-2和blaCTX-M-25;泌尿系统耐多药菌株blaCTX-M-1、blaCTX-M-9和blaCTX-M-8的检出率分别为58.82%、41.18%和5.88%,呼吸系统耐多药菌株blaCTX-M-1、blaCTX-M-9和blaCTX-M-8的检出率分别为55.56%、66.67%和22.22%,胸腹水耐多药菌株blaCTX-M-1、blaCTX-M-9和blaCTX-M-8的检出率分别为85.71%、42.86%和14.29%,其他类型耐多药菌株blaCTX-M-1、blaCTX-M-9和blaCTX-M-8的检出率分别为73.07%、50%和7.69%。结论:1.本地区临床分离的大肠埃希菌ESBLs阳性菌株常见,其中耐多药ESBLs阳性菌株达64.13%。2.BlaCTX-M在ESBLs阳性菌株中的检出率高,达93.48%;其中blaCTX-M-1为最主要的类型,其次为blaCTX-M-9,blaCTX-M-8较少、且与blaCTX-M-1和(或)blaCTX-M-9同时发现,未检出blaCTX-M-2和blaCTX-M-25。3.耐多药ESBLs阳性菌株常见的blaCTX-M类型为blaCTX-M-1、blaCTX-M-9。4.普外科、肝胆外科、胃肠外科、肾病内科、呼吸内科blaCTX-M-1常见;泌尿外科、血液内科blaCTX-M-9常见。
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