基于Endoglin靶的胶质瘤血管生成的MRI显像研究

来源 :复旦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liaozhouyi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:(1)合成靶向Endoglin的空间稳定型脂质体MRI对比剂并评价其基本特性;(2)探讨靶向Endoglin的空间稳定型脂质体MRI对比剂评价胶质瘤血管生成的价值,从而为客观准确评价肿瘤血管生成建立活体的MRI方法。 材料与方法:(1)以叔丁氧碳基保护的双氨基聚乙二醇(Boc-NH-PEG-NHS)、氢化蛋黄磷酯酰乙醇胺(HEPE)为原材料,首先合成Boc-NH-PEG-HEPE,然后去除叔丁氧碳基(Boc基团),合成NH-PEG-HEPE。通过NH-PEG-HEPE和SPDP发生反应,得PDP-PEG-HEPE,用于桥接抗体和脂质体。(2)配制8个不同浓度的磁显葡胺溶液,用日立F-3000型荧光分光光度仪测定其荧光,建立标准曲线。并对其稳定性、回收率和精密度进行考察。(3)先制备含有PDP-PEG-HEPE的空间稳定脂质体(PDP-SLs),再通过二硫苏糖醇(DTT)将其还原为表面带有巯基的脂质体(HS-SLs),最后与SMPB衍生化后的IgG或抗Endoglin抗体相连接即可得空间稳定免疫脂质体(IgG-SLs或Endoglin-SLs),并用激光散射粒度分析仪行粒径分析。用钼蓝法测定磷脂浓度;用125I标记法检测空间稳定免疫脂质体中抗体的连接效率、脂质体表面抗体密度;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测空间稳定免疫脂质体中抗体的免疫活性。(4)采用薄膜法和冻融法制备基于Endoglin靶的钆空间稳定型免疫脂质体对比剂(Endoglin-Gd-SLs),并用同样方法制备IgG-Gd-SLs、Gd-SLs。采用透射电镜观察脂质体的形态。并对其粒径大小及粒径分布进行分析。利用荧光法测定脂质体中Gd的包封率,并计算其载药量。分析不同HEPC/Chol/mPEG-DSPE/PDP-PEG-HEPE比例、Gd-DTPA浓度、pH值、脂质体的粒径等因素对Gd-DTPA包封率和载药量的影响。并对其粒径稳定性、药物泄漏率进行考察。(5)40只皮下接种F98胶质瘤的Fischer344大鼠随机分为四组,分别静脉注射本研究合成的Endoglin-Gd-SLs、IgG-Gd-SLs、Gd-SLs及Gd-DTPA。于注射前、注射后即刻、5min、30min、1h、2h等时相点行MRI扫描,计算每个时相点的CNR和增强最明显时相点的相对信号强度,并比较各组的MRI增强特点。扫描结束后活杀动物,取材,行Endoglin免疫荧光;α-SMA、VEGF免疫组化染色。分别对Endoglin、α-SMA所标记的微血管计数(E-MVD、S-MVD),并计算二者之和(T-MVD)。同时用标记指数(LI)来反映VEGF阳性染色情况。分析各组增强最强时相点的相对信号强度与E-MVD、S-MVD、T-MVD及VEGF LI的相关性。 结果:(1)荧光法测定磁显葡胺含量的条件:激发波长275nm,发射波长312nm,pH范围6.0-8.0,线性范围5×10-5mol/L—1mol/L。(2)所合成的IgG-SLs或者
其他文献
为了减轻文字工作者的工作压力,降低企业在文档编制领域的成本开销,文章设计了一种应用于文本写作中的混合推荐模型。在用户编写文档时,利用混合推荐模型可实现根据用户身份
本文旨在研究低剂量深部输精操作及应用技术。每批受配母猪头数设计为1、5、10、15、20头,探讨每批母猪头数对内管插入阻碍率的影响;输精剂量设计为40、60 mL深部输精和80 mL
针对应用广泛的低密度、低膨胀、高热导、高比强的高硅铝合金,采用快速凝固喷射沉积技术制备了Al-40Si高硅铝合金锭坯,通过光学显微镜及扫描电镜对其组织进行了分析.结果表明
1500mm宽带精轧机支承辊油膜轴承稀油润滑系统的工作原理,分析造成油膜轴承压力罐无法正常工作的原因,提出相应改进措施,保证油膜轴承润滑系统正常运行。
随着喷墨打印技术的快速发展,涉及伪造喷墨打印文件的合同诈骗、贪污、逃税、制作假币等各类犯罪案件呈现高速增长态势。这些案件中,喷墨打印文件往往成为确定案件性质的关键
本文在成功制备诱导小鼠骨髓来源DC的基础上,以IFN-α基因修饰DC,探讨了IFN-α对DC体外分化成熟的影响及体内外抗胶质瘤效应及其机制。证实:(1)以Ad-IFN-α转染DC,促进DC的分
背景: 多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)是以局灶性脱髓鞘为特征的中枢神经系统(CNS)感染性疾病,被认为是髓鞘特异性T细胞介导的自身免疫性疾病。全世界约有110万患者
烹饪教育课程资源相对于课程资源的内涵特点,其在外在表现上还具有体验性、实践性和人文性.“杭帮菜”非物质文化遗产融入烹饪课程体系面临的困境为:“非遗”资源向课程要素转