转铁蛋白受体在成人急性白血病中的表达及其临床意义

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研究背景与目的:本研究前期对M2型急性髓系白血病(M2-subtype of acute myeloblastic leukemia, AML-M2)的蛋白质组分析发现,转铁蛋白受体(transferrin receptor, TfR)在其CD34+以及CD34-细胞的表达均增高。TfR除参与铁代谢外,由于其在多种肿瘤的异常表达,近期研究认为它与肿瘤的发生也有关。虽然,有研究显示,TfR在白血病的表达增高,并认为TfR在白血病细胞增殖中可能发挥重要作用,但这些研究仅仅局限于TfR的转录水平,即对TfR mRNA表达的研究。尤其是,在成人急性白血病(acute leukemia,AL)中,有关TfR蛋白的表达研究至今尚未见相关报道。为此,本研究采用逆转录-聚合酶连式反应(revers transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)技术、流式细胞术(flow cytometry, FCM)和免疫印迹(Western blot, WB)技术,从基因转录和翻译水平全面分析成人AML和急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞两种TfR,即TfRl和TfR2的表达,并探讨它们在AL的临床意义,为今后进一步研究TfR在AL的作用建立基础。方法:首先,用淋巴细胞分裂液从初治AL患者及造血干细胞移植供者动员后的外周血中分离出单个核细胞。然后,通过RT-PCR方法分析TfRl、TfR2在AL患者单个核细胞mRNA水平的表达;通过FCM技术分析AL患者单个核细胞表面TfR1蛋白的表达,采用WB方法确定TfR2蛋白在AL患者单个核细胞中的表达。在此基础上,分析TfR的表达在AL中的临床意义。结果:(1)本研究结果显示,TfR1mRNA在正常组、AML和ALL组表达率分别为100%,55.2%和63.6%。统计学分析显示,这三组TfR1mRNA的表达率总体无统计学差别(P=0.063),正常人与ALL组、ALL组与AML组之间,TfR1mRNA表达的阳性率也无统计学差别(P=0.103,P=0.730),但正常人与ALL组之间,TfR1mRNA表达的阳性率有统计学意义差异(P=0.032)。电泳后扫描、定量各PCR产物灰度值与内参灰度值之比,结果显示,正常组、AML和AL组TfR1mRNA的表达水平分别为0.1912,0.2049和0.2027。统计分析表明,此三组之间TfR1mRNA相对表达量的差异无统计学意义(P>0.05)。同时,本研究结果发现,正常组、AML和ALL组,TfR2mRNA表达率分别是12.5%,55.2%和9.0%,此三组TfR2mRNA表达率总体有统计学差别(P=0.008),正常组与ALL组无统计学差别(P=0.811),但正常组与AML组,ALL组与AML组有统计学差别(P=0.032,P=0.012)。(2)对TfR蛋白水平的进一步分析发现,正常组不表达TfR1蛋白,而其在AML组和ALL组的表达率分别为9.1%和17.2%。统计学分析显示,三组表达率总体无统计学差别(P=0.395),正常人与ALL和AML组均无统计学差别(P=0.381, P=0.207), ALL与AML组比较也统计学差别(P=0.519)。同时,正常组以及ALL组不能检测到TfR2蛋白,但AML组TfR2蛋白的表达率为55.6%,三组总体表达率有统计学差别(P=0.000),正常人与AML组有统计学差别(P=0.001),ALL组与AML组比较有统计学差别(P=0.005)。(3)临床资料分析显示,无论是mRNA还是蛋白,TfR1以及TfR2的表达率与各组AL患者年龄、性别、初始白细胞计数、骨髓幼稚细胞百分比无明显相关(P>0.05):TfR1mRNA和蛋白的表达均与AML分型无明显相关(P=0.730,P=0.519),但TfR2mRNA和蛋白表达率与AML分型高度相关(P=0.012,P=0.001),在急性髓系白血病表达率明显增高。同样,TfR1mRNA相对表达水平、与患者年龄、初诊时外周WBC计数、Hb、LDH无相关关系(P>0.05),TfR2(mRNA和蛋白)相对表达水平与患者年龄、初诊时外周WBC计数、:Hb、LDH亦无显著相关关系(P>0.05)。但TfR2(mRNA和蛋白)相对表达水平与LDH呈显著负相关(r=-0.670,r=-0.760)。结论:TfRl在AL中的表达与正常人基本相同,表明TfR1可能与AL无关;TfR2在AML中的表达明显高于正常人及ALL患者,意味着TfR2可能参与了AML的发生发展,并有可能用于AL的诊断及鉴别诊断;TfR2的表达与AL肿瘤负荷指标呈负相关,这可能提示TfR2在AL患者的预后评估中发挥着作用。
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