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本文讨论了西医学和中医学对恶性淋巴瘤(lymphoma)的认识及现代研究进展,通过对80 例恶性淋巴瘤患者中医辨证分型与T细胞亚群免疫表型CD4、CD8、CD4/CD8 的相关性进行研究,初步探讨T细胞亚群免疫表型与中医辨证分型各证型的关系,并以此为课题进行临床观察研究。
目的:探索恶性淋巴瘤的T细胞亚群免疫表型CD4、CD8、CD4/CD8与中医辨证分型的相关性,为恶性淋巴瘤中医辩证分型提供T细胞免疫学方面的依据,并初步探索CD4、CD8、CD4/CD8与恶性淋巴瘤发生的关系。
方法:选择80例符合恶性淋巴瘤西医诊断标准的患者,患者均经淋巴结活检术后组织学、病理学诊断,按中医辨证分型将患者分为寒痰凝滞、痰瘀互结、肝肾阴虚、气血亏虚4个证型。对照组为门诊健康体检人员20名,临床除外肿瘤性疾病、感染性疾病,予T细胞亚群检测,所有观察对象均于清晨空腹抽取静脉血1ml,EDTA-K2抗凝,应用荧光直接标记法及流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMNC)膜表面CD4、CD8、CD4/CD8的表达。具体方法如下:取EDTA-K2抗凝血0.1ml,分别加入CD4、CD8、CD4/CD8抗体各20μl,室温下孵育30分钟, 加入红细胞裂解液,用破膜剂及固定剂处理红细胞处理红细胞,然后上机检测。流式细胞仪检测条件及参数如下:采用美国BECKMAN COULTER公司生产的Epics-XLⅡ型流式细胞仪,激发光源为15mW氩离子激光器,激发波长为488nm,应用Expo 32 ADC进行免疫荧光数据分析,用Muticycle AV分析对DNA细胞周期拟合分析。检测前以flow-checkTMFluorpheres(10μm)荧光微球(REF6605359.BeckmanCoulter,Inc.Fullerton,CA 92835.)作为标准样品调整仪器CV值在2%以内。最后比较、分析各组数据,得出CD4,CD8,CD4/CD8与中医辨证分型间的相关性。
结果:淋巴瘤患者组CD4、CD8、CD4/CD8 值与健康人组比较有统计学差异(P<0.05),恶性淋巴瘤患者各证型间CD4 值比较差异均显著(P<0.05);寒痰凝滞与痰瘀互结、肝肾阴虚、气血亏虚证间CD8 值比较有显著差异(P<0.05),痰瘀互结,气血亏虚,肝肾阴虚三证间无显著差异(P>0.05);各证型间CD4/CD8 值均无显著差异(P>0.05)。
结论: CD4、CD8 、CD4/CD8与恶性淋巴瘤的发生有一定的联系,患者免疫功能低下时恶性淋巴瘤发生率较正常人高;CD4在恶性淋巴瘤各中医证型间具有显著差异性(P<0.05),各中医证型与CD4之间有一定的关系,不同证型间CD4值不同;CD8的不同水平可使恶性淋巴瘤寒痰凝滞、痰瘀互结区别于其他证型(P<0.05)。因此CD4与CD8可作为中医证候的参考指标之一。