水稻作为我国主要粮食作物与人民生活息息相关,全国种植水稻的地区分布广泛。东北地区土地肥沃,夏季温度适宜,光照充足,近年来一直作为我国优质水稻的主要产区。水稻种植生产中往往伴随有多种病虫害的发生,水稻产量不可避免受到一定影响。针对常见水稻病害,培育和推广种植水稻抗病品种是病害综合防治的主要手段,但这样可能会引发一些新型病害。近年来国外有多个地区发现泛菌属细菌引起的水稻病害,国内也有泛菌属细菌引起水稻穗部病害的报道。本文于2016和2017年在辽宁丹东和吉林公主岭、拉溪地区发现一种水稻叶部病害,田间初步观察其病状与由Xoo引起的水稻白叶枯病症状相似,病斑沿叶边缘扩展,失水干枯。通过对采集的发病叶片进行病原物分离和鉴定、以及致病性测定试验,确定了该病害是由一种由菠萝泛菌引起的水稻叶部病害。此外,本研究对引起该病的菠萝泛菌的生物学特性进行分析,并初步探究该细菌侵染与水稻的互作关系,具体研究结果如下:1.本文从水稻田间采集代表性发病叶片,采用稀释分离法从发病叶片上共分离获得到43个代表性菌株。通过对细菌分离物的生理生化试验、16S rDNA和gyrB基因的序列分析,28株细菌鉴定为泛菌属,其中菠萝泛菌19株,该细菌在每个地区的水稻病叶中都能分离到。将分离的43株细菌分离物接种烟草叶片,结果表明,所有菠萝泛菌和成团泛菌都能造成烟草过敏反应。选取来源于不同地区的6株菠萝泛菌和4株成团泛菌,采用剪叶法将其接种水稻叶片,其中4株菠萝泛菌能够引起水稻叶片枯萎症状,从人工接种的发病稻叶上仍能分离获得菠萝泛菌,完成柯赫氏法则验证,确定菠萝泛菌为该水稻叶部病害的致病因子,这是国内首次报道由菠萝泛菌引起的水稻叶部病害。2.菠萝泛菌能够侵染水稻、玉米等多种寄主植物,但有关菠萝泛菌的生物学特性尚无具体研究,本文测试了不同条件包括温度、pH、盐浓度对菠萝泛菌生长的影响。结果发现,菠萝泛菌的最适温度为28-32℃,温度过高或过低都会减缓细菌的生长速度,53℃为该细菌的致死温度;该细菌适宜在pH值为5.7-7.4的中性及弱酸性条件下生长,pH高于8.2的弱碱性条件下生长速度迟缓,强酸强碱条件下无法生长;该细菌在盐浓度为1-3%的环境下生长速度较快,盐浓度越高生长速度越低,在盐浓度高于9%环境下无法生长。在Kan、Amp、Gm、Cep常用抗生素平板上都无法生长。3.为探究菠萝泛菌侵染与水稻的互作关系,采用剪叶法将该细菌接种水稻植株叶片,接种后分别在0、12、24、48、72h采集水稻叶片,使用Trizol法提取RNA,通过qRT-PCR检测不同采集时间点防卫基因(RR1b和RR5)的相对表达量。结果表明,接种24 h后,RR1b和RR5基因的相对表达量逐渐升高;接种72 h时,RR1b基因表达量上调18倍,RR5基因表达量上调23倍,PAL基因变化趋势不明朗。这表明该细菌侵染水稻叶片后能诱导调控防卫基因的表达。