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目的:三七作为名贵中药材,由于受连作障碍和市场需求的影响,现三七种植呈现出向高海拔、低温地区引种的趋势。为了向三七引种种植提供理论依据,实验进行了不同温度对不同生长年限三七的总皂苷、光合生理影响的测定,以及研究了不同温度对3年生三七叶测序结果的影响。方法:1、本研究通过HPLC分析了在10℃、15℃、20℃下处理30d的1、2、3年生三七根部皂苷含量的变化。2、将10℃、15℃、20℃下处理30d的1、2、3年生三七,使用LI-COR 6400便携式光合测定仪进行光合参数,采用硫代巴比妥酸(TAB)比色法进行MDA的检测,并对比了3个温度下的光合色素含量。3、将10℃、15℃、20℃下处理30d的3年生三七,以及在种植基地生长正常、长势一致的三年生三七(为对照组CK),利用HPLC测定其主根、剪口、茎和叶四个部位的4种单体皂苷及其总皂苷含量。4、将10℃、15℃、20℃下处理30d的3年生三七,以及在种植基地生长正常、长势一致的三年生三七(为对照组CK)取其顶端新鲜叶片,通过Illumina NovaSeq6000平台和PacBio Sequel平台进行测序。结果:1、通过比较10℃、15℃和20℃下培养30d的1年、2年和3年生三七根部三七总皂苷含量,发现2、3年生三七,15℃、10℃对其根部皂苷积累的影响不显著,三七皂苷积累的最适温度为20℃;1年生三七在10℃时三七皂苷含量最高,在一定的温度范围内,较低的温度有利于1年生三七的皂苷含量积累。2、通过比较10℃、15℃和20℃下培养30d的1年、2年和3年生三七的光合生理,整体而言随温度的降低,三七的光合生理作用减弱;2、3年三七MDA在10℃时含量最高,1年生三七MDA在15℃时含量最高;2年生三七其Chla、Chlb和carotenoid均在15℃时最高;不同年限的三七在低温情况下,其光合生理存在差异。3、通过HPLC法比较10℃、15℃、20℃下培养30d的3年生三七以及CK组三七的剪口和主根皂苷含量。研究发现,3年生三七主根三七总皂苷含量以20℃时最高,15℃和10℃三七总皂苷含量也均高于CK组。剪口中的三七总皂苷含量以15℃时最高,20℃和10℃时,其所含三七总皂苷也均高于CK组。15℃时三七叶中所含三七总皂苷含量最高,20℃时最低。同时采收期的三七皂苷总含量高于提前采收的CK组。4、将三七叶通过二代测序和三代测序相结合的方法,在PacBio Sequel平台测得读取聚合酶729094个,总数据共25.80 GB。且Isoform在NR、NT、GO、KOG、Pfam、KEGG和Swissprot七大功能数据库注释到34990个。在GO、KEGG、NR、Swissprot、Trembl和eggNOG成功注释到21959个新基因。二代测序结果中,15℃组测得总可变剪切事件最高。三代测序结果中,可变剪切形式占转录本的60.4%。同时基因MSTRG.10001仅在10℃组中比对到,其余三组均无比对到。通过NT和NR注释,发现三七叶基因与胡萝卜、葡萄、芝麻、咖啡等均有相似比率。KOG发现一般功能预测所占基因数最多。GO分类表明20℃和10℃其差异表达基因最多。KEGG发现三七叶中参与代谢的基因最多。通过SwissPort注释发现NR所特有的基因最多。结论:温度对不同生长年限的三七其皂苷积累影响存在差异。其中,15℃、10℃有利于1年生三七的皂苷积累,2、3年生三七,在20℃时则是最适宜其皂苷积累。较低温度不利于三七的光合作用,且较低温度会造成三七体内MDA的含量增多。3年生三七中,较低温度条件下的三七主根和叶中的皂苷含量存在差异,但剪口和茎对温度不敏感。通过对三七叶的二代和三代测序,有利于进一步研究温度对合成三七皂苷相关基因的影响,也为接下来三七的基因组研究奠定了基础。