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目的： 本实验成功地建立了多囊卵巢大鼠病理模型，并以此为研究对象，运用光镜、放射免疫、免疫组化及末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术，观察中药补肾活血汤对多囊卵巢大鼠内分泌、卵巢形态学的影响，重点研究卵巢卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡及Bcl-2，Bax的表达情况，以期从细胞及分子水平揭示补肾活血汤的作用机制，为新药的研制和开发提供理论依据。 材料及方法： 选用24日龄未成年雌性SD大鼠60只，随机分为病理模型组50只和正常对照组10只。应用皮下埋植左炔诺孕酮硅胶棒联合皮下注射HCG法建立多囊卵巢动物模型。造模成功后给予补肾活血汤高、中、低剂量灌胃30天，对照组给予同容积蒸馏水灌胃。 于24日龄、36日龄、67日龄测体重，比较造模前后、用药前后大鼠体重。 大鼠断头处死，取血，收集血清样品，放免法测定血清中孕酮(P)、雌二醇(E2)、睾酮(T)的含量。 大鼠处死后立即取出双侧卵巢称重，分别测量卵巢长径(L)、短径(S)，计算平均卵巢面积MOP=L×S、卵巢体积V=4.19×((L+S)／2)~3。 卵巢切片常规HE染色，计算每张切片黄体数、囊状卵泡数、囊状扩张卵泡比例，进行卵泡膜细胞层最大厚度及颗粒细胞层最大厚度的显微测量。 TUNEL法检测颗粒细胞凋亡，以细胞核出现褐色颗粒为阳性结果，计算每张切片凋亡颗粒细胞数、闭锁卵泡数，测量最大闭锁卵泡直径。 采用免疫组织化学SABC法测定卵巢Bcl-2，Bax的表达。以细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性结果。每张切片在400倍高倍视野下随机取5个视野，根据阳性细胞所占比例和染色强度进行半定量判定。染色强度按下列标准评定：阴性为0分；染色虽弱但明显强于阴性对照者为1分；染色强度中等者为2分；染色强者为3分。染色的阳性细胞所占比例评定标准为：阳性细胞数＜5％为阴性(0分)；6％-25％为弱阳性(1分)；26％-50％者为阳性(2分)；51-75％者为强阳性(3分)；＞75％者为非常强阳性(4分)。两种评分相加，即为其阳性积分。 数据处理：计量资料以均值±标准差表示，组间差异的比较采用双侧t检验。率的比较采用两样本率等价比较的u检验。P＜0.05为差别显著，P＜0.01为差别非常显著。 结果： 大鼠体重：补肾活血汤高、中、低剂量组大鼠用药前体重与模型组比较无显著性差异，用药后均明显低于模型组。 卵巢大体解剖观察结果：造模后模型组大鼠卵巢重量、体积、平均卵巢面积均大于对照组(P均＜0.01)，卵巢表面较苍白，见较多囊状扩张的卵泡。补肾活血汤治疗后卵巢色泽红润，高剂量组卵巢重量较模型组(67日龄)明显降低(P＜0.05)，卵巢体积、平均卵巢面积较模型组(36日龄)均明显降低(P均＜0.05)。 卵巢形态学：造模后模型组囊状扩张卵泡比例明显增加，囊状扩张卵泡内卵母细胞或放射冠消失，颗粒细胞层数减少，排列疏松，颗粒细胞层厚度较对照组明显变薄，P＜0.01，泡膜细胞层厚度较对照组明显增厚，P＜0.05，内外卵泡膜细