【摘 要】
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作者发展了一种基于RT-PCR检测体外转录生成的RNA的方法,该法灵敏,无需同位素;此外,作者还对早期胎盘合体滋养层细胞进行了富集.这些方法学的研究成果使作者有可能对hCGβ5基
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作者发展了一种基于RT-PCR检测体外转录生成的RNA的方法,该法灵敏,无需同位素;此外,作者还对早期胎盘合体滋养层细胞进行了富集.这些方法学的研究成果使作者有可能对hCGβ5基因在人早期胎盘滋养层组织中的转录控制规律进行深入的探讨.该研究首次分析了不同长度hCGβ5基因启动区在人早期胎盘滋养层组织核抽提物中的活性,并从中鉴定出hCGβ5基因近端启区的一些特异的DNA结合蛋白.该研究发现hCGβ5基因全序列启动区(-1bp至-3.5kb)或-1bp至-39bp启动区的体外转录活性远高于-1bp至-145bp启动区的转录活性.进一步,发现在人早期胎盘滋养层组织核抽提物中,hCGβ5基因启动子近端区(-145bp至-84bp)有促进转录的功能.用凝胶区带漂移(GMSA)的方法,作者发现了一种能特异结合于-124bp至-80bp的蛋白.这种蛋白仅存在于高表达hCGβ5基因的人早期胎盘滋养组织和JAr细胞的核抽提物中,在hCGβ5基因表达水平不高的分娩胎盘组织或极低水平的HeLa细胞的核抽提物中则不存在.这些结果提示该蛋白可能在hCGβ5基因的转孙控制中起作用.竞争实验表明该蛋白并非已发现的一些转录因子,如Sp1,Ap2,NF1/CTF.
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