【摘 要】
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目的:（1）探索提高院前急救培训方式,包括对象选择和培训技能,从而提高院前急救培训水平。（2）端粒是氧化应激的DNA损伤靶点,筛选以端粒为靶点的潜在的氧化应激分子标志物,有助于预
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目的:（1）探索提高院前急救培训方式,包括对象选择和培训技能,从而提高院前急救培训水平。（2）端粒是氧化应激的DNA损伤靶点,筛选以端粒为靶点的潜在的氧化应激分子标志物,有助于预测器官的氧化损伤。方法:（1）对上海市5所中学的学生进行问卷调查,筛选有效问卷后进行统计分析,得出结论并给出急救培训建议。（2）TRF2基因敲除(TRF2-/-)斑马鱼胚胎是氧化应激损伤的模型。RT-q PCR法检测端粒结合蛋白TRF2是否能够调控氧化应激相关基因PUM3、PACSIN3的表达量,并显微注射PUM3、PACSIN3 m RNA至TRF2-/-斑马鱼受精卵后统计注射组斑马鱼胚胎畸形率,并与对照组作比较。结果:（1）中学生急救知识平均得分23.69±4.612分（满分40分）,性别、兴趣等是影响中学生急救知识掌握程度的因素之一。（2）本课题组前期结果显示人类TRF2能够结合PUM3的端粒间质重复序列（ITS）;RT-q PCR结果表明斑马鱼胚胎中TRF2能够调控PUM3的表达。构建斑马鱼PCS2-PUM3质粒并体外转录获得PUM3 m RNA后,显微注射斑马鱼PUM3 m RNA至TRF2-/-斑马鱼受精卵能够降低TRF2-/-斑马鱼胚胎畸形率,提示PUM3能够补救TRF2缺失造成的氧化损伤;虽然前期结果显示TRF2无法结合PACSIN3的ITS序列,但PACSIN3结果与PUM3类似。结论:（1）中学生急救知识掌握欠佳,但对于急救态度积极,可以通过急救演习来提高中学生急救能力;（2）TRF2能够调控PUM3、PACSIN3等氧化应激相关基因表达,以这些分子为靶点有望临床上早期发现或预报氧化应激,并有望成为提高急救效率的靶点。
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