西瓜MAPK和MAPKK家族基因的鉴定、表达模式和功能分析

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyqi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
植物在整个生命过程中,不断遭受外界环境的各种胁迫。逆境胁迫严重影响了植物的生长发育,为了应对这些胁迫,植物进化出了一套精细调控的信号传导网络。促分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases, MAPK)级联途径在真核生物中十分保守,它是一种十分重要的信号传导系统。MAPK级联途径包括三个级别的功能蛋白激酶,分别是MAPKKK、MAPKK和MAPK。MAPK级联通过将胞外信号逐级放大并传递至细胞内,在调控植物的许多生理生化过程中起重要作用。西瓜是一种双子叶开花植物,耐旱喜温,在我国大多数地区均有种植。相比拟南芥和水稻,有关西瓜中MAPK、MAPKK的报道十分有限,相关的研究还不够深入。运用生物信息学方法,利用已经公开的西瓜基因组数据库,本研究鉴定了西瓜中15个MAPK基因(CIMPKs)和6个MAPKK基因(ClMKKs),并对它们进行了命名、分类、系统进化树构建、蛋白序列比对、保守结构域分析、染色体定位、表达模式分析、蛋白互作分析及抗病功能研究。主要研究结果如下:(1)利用拟南芥中MAPK、MAPKK家族成员蛋白序列的同源搜索,在西瓜基因组中鉴定到15个MAPK和6个MAPKK基因。蛋白序列比对、保守基序和系统进化树分析结果表明,西瓜中MAPK、MAPKK成员也可以分为A、B、C、D四个亚组。染色体定位分析显示,(ClMPKs和ClMKKs的21个基因分布在西瓜的10条染色体上。从进化角度看,有些西瓜MAPK和MAPKK基因涉及到串联复制,部分则产生于染色体片段复制事件。(2)通过qRT-PCR技术分析了西瓜中21个MAPK、MAPKK基因在根、茎、叶等不同组织器官,干旱、高盐、低温、高温等非生物胁迫,ABA、SA、 JA、ACC等激素诱导和西瓜枯萎菌侵染时的表达模式,结果表明:ClMPK19、 CIMPK7、CIMKK6在组织特异性表达中差异极显著;干旱处理后,CIMPK4-2、CIMPK7的表达量明显高于其他基因;盐处理后,只有ClMPK7响应胁迫,其他基因的表达量无明显变化;低温处理后,ClMPK7、CIMPK9-1、CIMPK9-2、 ClMPK9-4下调表达量远远高于其他基因;高温处理后,CIMPK7、CIMPK20-1、 ClMPK9-4上调表达量较其他基因高;在西瓜枯萎菌侵染后第9d时,CIMPK3、 ClMPK7、CIMKK5的表达量分别为对照的9倍、13倍和6倍。CIMPK7在各种处理中的表达量均显著高于其他基因,同时,该基因在干旱胁迫、高温胁迫、ABA诱导时高度上调,而在低温胁迫时高度下调,这说明了ClMPK7很有可能同时参与了多条不同的信号转导途径,并在其中扮演关键角色。(3)采用酵母双杂交技术分析西瓜中8个MAPK基因和5个MAPKK基因的蛋白互作情况,结果表明:ClMPK4-1不仅可以和ClMKK2-1发生互作,还能与(l1MKK6、ClMKK9发生互作;此外,ClMKK2-1也可以同时与ClMPK4-1、 C1MPK4-2、ClMPK13互作。一个MAPK蛋白可以同不止一个MAPKK蛋白互作,而一个MAPKK蛋白也可以和多个MAPK蛋白互作,从而我们推测西瓜中MAPK与MAPKK之间存在着一种复杂的交叉相互作用,这进一步揭示了MAPK级联途径在信号转导中的多样性。(4)利用农杆菌介导的瞬间表达技术,我们将西瓜中14个MAPK、MAPKK基因在本氏烟中瞬时表达后接种灰霉菌,用于检测基因的抗病功能。结果表明,ClMPK7瞬时表达后可以诱导防卫基因的表达和活性氧的积累,从而减轻灰霉菌对本氏烟的侵害。另外,ClMPK7还可以诱导过敏性坏死反应。
其他文献
目的:分析在胃溃疡患者治疗中联合应用黄芪建中汤和奥美拉唑治疗的效果。方法:随机抽取2015年6月—2016年6月期间在我院治疗的80例胃溃疡患者,根据治疗方式不同分成治疗组和参照
目的:探讨优质护理对老年糖尿病肾病血液透析病人的应用效果.方法:选取我院2017年3月—2018年3月期间收治的老年糖尿病肾病血液透析患者60例为研究对象,均分为两组,对照组为
目的:观察老年高血压患者使用氨氯地平、瑞舒伐他汀联合的方案治疗的效果及对老年患者动脉硬化的影响.方法:选取我院老年高血压患者90例(2015年2月—2017年1月期间),将其动态
棉花良种加工质量的全程控制江苏省东台市种子公司黄慧明,任颐东台市原种轧花剥绒厂开卫清,崔益富随着棉种深加工生产线的不断建成,棉花良种的标准化、商品化水平随之提高。如何
期刊
目的:探讨检中尿液及肾功能检查对肾脏疾病筛查的意义。方法:回顾性分析接受尿液和肾功能检查的800例成年体检者的临床资料,按年龄分为青年组(≤45岁)、中年组(46~64岁)、老年组(≥65
萤火虫在虫体羽化前幼虫发光器(larval light organ)始终存在并正常行使功能,成虫发光器(light organ)则在蛹期独立发生,目前尚无关于成虫发光器发育的明确报道。  Hox基因(Homeot
本文在国内外首次制备出了分别针对褐飞虱Nilaparvata lugens和稻田多种弹尾虫Collembola复合种群的单克隆抗体,并应用褐飞虱、弹尾虫和白背飞虱Sogatellafurcifera的单克隆抗
目的:分析研讨儿童胃溃疡与心理因素相关性,并总结。方法:此研究中所研讨的210例患者均随机从2015年2月至2016年2月期间我院收治的儿童胃溃疡患者中挑选而出,此210例患者划分到研
在实验室条件下,用聚乙二醇(PEG—6000)溶液模拟干旱条件,测定了10个苜蓿品种幼苗的组织相对含水量、地上部分干物质产量、相对生长率、细胞膜透性、过氧化物酶活性、游离脯