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【目的】
1.检测外阴阴道念珠菌病（Vulvovaginalcandidiasis，VVC）患者外周血及分泌物中天然免疫相关因子水平，分析因子间相关性，探讨天然免疫相关因子与该病发病的关系。
2.检测VVC患者外周血及分泌物中氧化应激相关因子水平，分析因子间相关性，探讨氧化应激相关因子与该病发病的关系。
【方法】
1.本研究根据2015年世界疾病控制与预防中心修订的VVC诊断标准，随机选取有典型VVC临床表现的患者，如外阴瘙痒、疼痛或刺痛、异常豆腐渣样白带等，并按照临床症状特点及评分标准分为轻中度VVC组、重度VVC组及复发性外阴阴道念珠菌病（Recurrentvulvovaginalcandidiasis，RVVC）组，并选择正常体检者作为对照组。
2.采样方法：于各组患者月经干净后第3天，在无菌条件下用干燥管和EDTA-K2抗凝管采集患者外周静脉血3ml，放置-80℃备用。同时，用棉拭子采集各组患者阴道后穹隆分泌物两份，一份棉拭子进行真菌涂片及培养，另一份棉拭子放入有1ml无菌磷酸盐缓冲液的离心管中，储存于-80℃冰箱。
3.选取天然免疫相关因子：Toll样受体4（Toll-likereceptor4，TLR4）、高迁移率族蛋白1（Highmobilitygroupbox1，HMGB1）、白介素-17A（Interleukin-17A，IL-17A）、白介素-23（Interleukin-23，IL-23）；氧化应激相关因子：超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathioneperoxidase，GSH-Px）、晚期糖基化终末产物（Advancedglycationendproducts，AGEs）、晚期氧化蛋白产物（Advancedoxidationproteinproducts，AOPP）为标记物，采用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）法检测患者外周血及分泌物中上述因子的水平。
4.采用GraphPadPrism5软件进行统计分析，各组间比较采用两独立样本t检验，各检测指标浓度间相关分析、各检测指标浓度与临床资料间的相关分析采用直线相关分析，以P﹤0.05视为有统计学意义。
【结果】
1.本研究共纳入VVC患者105例，平均年龄为(33.4±9.8)岁，其中轻中度VVC组51例、重度VVC组21例、RVVC组33例；对照组39例，平均年龄(31.2±8.8)岁。
2.天然免疫相关因子的水平：
（1）外周血HMGB1，与正常对照组（3.28±3.26ng/ml）相比，重度组（7.64±7.41ng/ml，t=2.971，P=0.008）及RVVC组（13.70±27.07ng/ml，t=2.365，P=0.005）显著上升；
（2）外周血IL-17A，与正常对照组（1.67±0.43pg/ml）相比，轻中度组（2.13±1.42pg/ml，t=2.370，P=0.024）及重度组（2.41±1.46pg/ml，t=2.987，P=0.008）显著上升；
（3）分泌物IL-17A，与对照组（14.56±6.43pg/ml）相比，轻中度组（18.28±17.06pg/ml，t=2.273，P=0.029）、重度组（27.39±19.20pg/ml，t=2.097，P=0.049）及RVVC组（22.47±18.74pg/ml；t=2.075，P=0.046）显著上升；
（4）外周血IL-23，与对照组（29.08±9.21pg/ml）相比，轻中度（32.84±28.62t=2.948，P=0.008）、重度组（32.92±7.15pg/ml，t=2.955，P=0.008）及RVVC组（30.49±9.75pg/ml，t=2.940，P=0.009）显著上升；
（5）分泌物IL-23，与对照组（42.78±5.85pg/ml）相比，轻中度组（43.29±8.55pg/ml，t=2.624，P=0.017）显著上升，而重度组（45.87±8.89pg/ml，t=1.776，P=0.092）及RVVC组（43.84±16.42pg/ml；t=0.056，P=0.956）无统计学差异；
（6）外周血及分泌物TLR4，与对照组相比，轻中度组、重度组及RVVC组均无统计学差异。
3.天然免疫因子间的相关性：
（1）外周血HMGB1水平与IL-17A、IL-23表达成正相关（r=0.166，P=0.048；r=2.152，P=0.029）；
（2）外周血IL-23水平与IL-17A表达成正相关（r=0.689，P＜0.001）；
（3）分泌物IL-23水平与IL-17A表达成正相关（r=0.268，P=0.001）。
4.天然免疫相关因子与VVC疾病严重程度的相关性：
外周血HMGB1水平与疾病严重度成正相关（r=0.286，P=0.001）；分泌物IL-17A水平与疾病严重度成正相关（r=0.273，P=0.001）。
5.氧化应激相关因子水平：
（1）外周血SOD，与正常对照组（0.69±0.37μg/ml）相比，重度组（0.88±0.50μg/ml，t=3.103，P=0.006）显著上升；
（2）分泌物SOD，与正常对照组（0.36±0.59μg/ml）相比，轻中度组（0.94±1.05μg/ml，t=2.811，P=0.009）、重度组（1.04±1.33μg/ml，t=2.604，P=0.021）及RVVC组（1.48±2.97μg/ml，t=2.137，P=0.042）均显著上升；
（3）外周血GSH-Px，与正常对照组（3.16±3.98μg/ml）相比，重度组（5.07±3.86μg/ml，t=2.197，P=0.040）显著上升；
（4）分泌物GSH-Px，与正常对照组（0.64±1.10μg/ml）相比，重度组（2.18±3.73μg/ml，t=2.480，P=0.023）及RVVC组（1.15±1.93μg/ml，t=2.247，P=0.032）显著上升。
（5）外周血AGEs，与正常对照组（64.75±27.76ng/ml）相比，重度组（45.37±27.91ng/ml，t=2.547，P=0.021）及RVVC组（46.42±26.73ng/ml，t=2.751，P=0.011）显著下降；
（6）分泌物AGEs，与正常对照组（157.44±85.37ng/ml）相比，重度组（135.26±86.42ng/ml，t=2.184，P=0.043）显著下降；
（7）外周血AOPP，与正常对照组（59.18±37.76nmol/ml）相比，轻中度组（35.91±29.36nmol/ml，t=2.818，P=0.008）及重度组（41.68±30.74nmol/ml，t=4.515，P=0.001）显著下降；
（8）分泌物AOPP，与正常对照组（384.52±277.25nmol/ml）相比，重度组（314.22±255.40nmol/ml，t=2.654，P=0.017）显著下降；
6.氧化应激因子间相关性：
分泌物AGEs水平与SOD、GSH-Px表达均成负相关（r=-0.254，P=0.004；r=-0.436，P=0.015）；分泌物AOPP水平与SOD、GSH-Px表达均成负相关（r=-0.178,P=0.045；r=-0.273,P=0.002）。
7.氧化应激相关因子与VVC疾病严重程度的相关性：
外周血GSH-Px表达与疾病严重程度成正相关（r=0.206，P=0.013），分泌物SOD表达与疾病严重程度成正相关（r=0.216，P=0.009）。
【结论】
1.VVC患者体内存在HMGB1、IL-17A、IL-23水平升高，高水平的HMGB1可能激活了TLR4受体，从而上调了下游炎症因子IL-17A和IL-23表达，促进了VVC炎症的发生及复发。
2.VVC患者体内存在SOD、GSH-Px水平上升及氧化末端产物AGEs、AOPP下降。阴道局部组织AGEs、AOPP水平的下降可能解除其对SOD、GSH-Px的抑制作用，导致巨噬细胞对念珠菌的吞噬作用减弱，促进了VVC的发病及复发。
1.检测外阴阴道念珠菌病（Vulvovaginalcandidiasis，VVC）患者外周血及分泌物中天然免疫相关因子水平，分析因子间相关性，探讨天然免疫相关因子与该病发病的关系。
2.检测VVC患者外周血及分泌物中氧化应激相关因子水平，分析因子间相关性，探讨氧化应激相关因子与该病发病的关系。
【方法】
1.本研究根据2015年世界疾病控制与预防中心修订的VVC诊断标准，随机选取有典型VVC临床表现的患者，如外阴瘙痒、疼痛或刺痛、异常豆腐渣样白带等，并按照临床症状特点及评分标准分为轻中度VVC组、重度VVC组及复发性外阴阴道念珠菌病（Recurrentvulvovaginalcandidiasis，RVVC）组，并选择正常体检者作为对照组。
2.采样方法：于各组患者月经干净后第3天，在无菌条件下用干燥管和EDTA-K2抗凝管采集患者外周静脉血3ml，放置-80℃备用。同时，用棉拭子采集各组患者阴道后穹隆分泌物两份，一份棉拭子进行真菌涂片及培养，另一份棉拭子放入有1ml无菌磷酸盐缓冲液的离心管中，储存于-80℃冰箱。
3.选取天然免疫相关因子：Toll样受体4（Toll-likereceptor4，TLR4）、高迁移率族蛋白1（Highmobilitygroupbox1，HMGB1）、白介素-17A（Interleukin-17A，IL-17A）、白介素-23（Interleukin-23，IL-23）；氧化应激相关因子：超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathioneperoxidase，GSH-Px）、晚期糖基化终末产物（Advancedglycationendproducts，AGEs）、晚期氧化蛋白产物（Advancedoxidationproteinproducts，AOPP）为标记物，采用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）法检测患者外周血及分泌物中上述因子的水平。
4.采用GraphPadPrism5软件进行统计分析，各组间比较采用两独立样本t检验，各检测指标浓度间相关分析、各检测指标浓度与临床资料间的相关分析采用直线相关分析，以P﹤0.05视为有统计学意义。
【结果】
1.本研究共纳入VVC患者105例，平均年龄为(33.4±9.8)岁，其中轻中度VVC组51例、重度VVC组21例、RVVC组33例；对照组39例，平均年龄(31.2±8.8)岁。
2.天然免疫相关因子的水平：
（1）外周血HMGB1，与正常对照组（3.28±3.26ng/ml）相比，重度组（7.64±7.41ng/ml，t=2.971，P=0.008）及RVVC组（13.70±27.07ng/ml，t=2.365，P=0.005）显著上升；
（2）外周血IL-17A，与正常对照组（1.67±0.43pg/ml）相比，轻中度组（2.13±1.42pg/ml，t=2.370，P=0.024）及重度组（2.41±1.46pg/ml，t=2.987，P=0.008）显著上升；
（3）分泌物IL-17A，与对照组（14.56±6.43pg/ml）相比，轻中度组（18.28±17.06pg/ml，t=2.273，P=0.029）、重度组（27.39±19.20pg/ml，t=2.097，P=0.049）及RVVC组（22.47±18.74pg/ml；t=2.075，P=0.046）显著上升；
（4）外周血IL-23，与对照组（29.08±9.21pg/ml）相比，轻中度（32.84±28.62t=2.948，P=0.008）、重度组（32.92±7.15pg/ml，t=2.955，P=0.008）及RVVC组（30.49±9.75pg/ml，t=2.940，P=0.009）显著上升；
（5）分泌物IL-23，与对照组（42.78±5.85pg/ml）相比，轻中度组（43.29±8.55pg/ml，t=2.624，P=0.017）显著上升，而重度组（45.87±8.89pg/ml，t=1.776，P=0.092）及RVVC组（43.84±16.42pg/ml；t=0.056，P=0.956）无统计学差异；
（6）外周血及分泌物TLR4，与对照组相比，轻中度组、重度组及RVVC组均无统计学差异。
3.天然免疫因子间的相关性：
（1）外周血HMGB1水平与IL-17A、IL-23表达成正相关（r=0.166，P=0.048；r=2.152，P=0.029）；
（2）外周血IL-23水平与IL-17A表达成正相关（r=0.689，P＜0.001）；
（3）分泌物IL-23水平与IL-17A表达成正相关（r=0.268，P=0.001）。
4.天然免疫相关因子与VVC疾病严重程度的相关性：
外周血HMGB1水平与疾病严重度成正相关（r=0.286，P=0.001）；分泌物IL-17A水平与疾病严重度成正相关（r=0.273，P=0.001）。
5.氧化应激相关因子水平：
（1）外周血SOD，与正常对照组（0.69±0.37μg/ml）相比，重度组（0.88±0.50μg/ml，t=3.103，P=0.006）显著上升；
（2）分泌物SOD，与正常对照组（0.36±0.59μg/ml）相比，轻中度组（0.94±1.05μg/ml，t=2.811，P=0.009）、重度组（1.04±1.33μg/ml，t=2.604，P=0.021）及RVVC组（1.48±2.97μg/ml，t=2.137，P=0.042）均显著上升；
（3）外周血GSH-Px，与正常对照组（3.16±3.98μg/ml）相比，重度组（5.07±3.86μg/ml，t=2.197，P=0.040）显著上升；
（4）分泌物GSH-Px，与正常对照组（0.64±1.10μg/ml）相比，重度组（2.18±3.73μg/ml，t=2.480，P=0.023）及RVVC组（1.15±1.93μg/ml，t=2.247，P=0.032）显著上升。
（5）外周血AGEs，与正常对照组（64.75±27.76ng/ml）相比，重度组（45.37±27.91ng/ml，t=2.547，P=0.021）及RVVC组（46.42±26.73ng/ml，t=2.751，P=0.011）显著下降；
（6）分泌物AGEs，与正常对照组（157.44±85.37ng/ml）相比，重度组（135.26±86.42ng/ml，t=2.184，P=0.043）显著下降；
（7）外周血AOPP，与正常对照组（59.18±37.76nmol/ml）相比，轻中度组（35.91±29.36nmol/ml，t=2.818，P=0.008）及重度组（41.68±30.74nmol/ml，t=4.515，P=0.001）显著下降；
（8）分泌物AOPP，与正常对照组（384.52±277.25nmol/ml）相比，重度组（314.22±255.40nmol/ml，t=2.654，P=0.017）显著下降；
6.氧化应激因子间相关性：
分泌物AGEs水平与SOD、GSH-Px表达均成负相关（r=-0.254，P=0.004；r=-0.436，P=0.015）；分泌物AOPP水平与SOD、GSH-Px表达均成负相关（r=-0.178,P=0.045；r=-0.273,P=0.002）。
7.氧化应激相关因子与VVC疾病严重程度的相关性：
外周血GSH-Px表达与疾病严重程度成正相关（r=0.206，P=0.013），分泌物SOD表达与疾病严重程度成正相关（r=0.216，P=0.009）。
【结论】
1.VVC患者体内存在HMGB1、IL-17A、IL-23水平升高，高水平的HMGB1可能激活了TLR4受体，从而上调了下游炎症因子IL-17A和IL-23表达，促进了VVC炎症的发生及复发。
2.VVC患者体内存在SOD、GSH-Px水平上升及氧化末端产物AGEs、AOPP下降。阴道局部组织AGEs、AOPP水平的下降可能解除其对SOD、GSH-Px的抑制作用，导致巨噬细胞对念珠菌的吞噬作用减弱，促进了VVC的发病及复发。