运动与诱导性共信号分子的表达及其生物学功能研究

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诱导性共信号分子(inducible costimulatory molecule, ICOS)是近年来新发现的CD28受体家族的一名新成员,是T细胞上一重要的免疫膜分子。ICOS分子与其配体GL50分子相互作用,传导第二信号,共同调节机体的免疫应答。在对ICOS分子已有的研究中发现,ICOS分子诱导性表达在活化的T细胞表面,与机体的炎症反应、自身免疫性疾病的发生发展、免疫应答的调节等关系密切。其潜在的应用前景引起了人们的广泛关注。但是,目前对ICOS分子生物学功能有限的研究,仍主要集中于小鼠且局限于临床免疫性疾病方面,在运动免疫领域,对人尤其对运动员的研究迄今未见报道。而持续运动训练对运动员免疫功能的慢性抑制效应及其效应机制的探讨,长期以来却始终是学者们的研究热点。鉴于此,本研究立足于运动训练对运动员免疫功能的影响,重点就人外周血T细胞ICOS分子的体外诱导表达、运动员体内ICOS分子的表达特征及其生物学功能进行了探索性研究。研究目的:1、通过普通健康人外周血T细胞的体外实验,研究和探讨ICOS分子的表达特征及生物学功能,从分子水平揭示应激激素、T细胞活化、ICOS分子表达之间的内在联系。2、通过对持续大强度运动训练的运动员不同训练阶段外周血T细胞表面ICOS分子表达水平的检测,研究和探讨运动训练对ICOS分子的诱导表达特征,从整体水平揭示持续运动应激、T细胞活化、ICOS分子表达之间的内在联系。3、通过对普通人T细胞体外培养上清液及运动员血清细胞因子的测定,研究和探讨ICOS分子上调表达对Th细胞分化影响的生物学功能,揭示ICOS分子表达与免疫功能改变之间的必然联系。4、通过对运动应激、T细胞活化、ICOS分子表达与免疫功能改变之间因果关系的分析研究,试图从一个新的视角诠释“运动性免疫抑制”的可能机制,为运动训练提供一重要的有价值的免疫监测指标,也为运动免疫干预提供一重要的目标性靶分子,从而有助于运动训练水平的不断提高,维护运动员的身体健康。研究方法:1、应激激素对T细胞ICOS分子体外诱导表达的作用1)运用密度梯度细胞分离技术,获得普通健康人外周血T细胞,继而采用细胞体外培养技术建立体外T细胞实验研究模型,选择应激激素皮质醇、去甲肾上腺素作为T细胞体外活化刺激因子,并观察这些因子对ICOS分子上调表达的诱导作用;2)运用细胞体外增殖实验(MTT)技术、免疫荧光标记法和流式细胞术,检测经应激激素
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