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游动放线菌Actinoplanes sp.常用于发酵制备降糖药物-阿卡波糖,生产后会产生大量的固体废渣,需要委托环保部门进行处理。然而,这些废渣中含有较多未被利用的活性成分,因此,开发废渣中有效成分的高效提取方法,进行资源再利用具有重要的研究价值。本文主要围绕游动放线菌发酵废渣中肽聚糖的提取方法、分离纯化及生物活性研究等方面展开研究,以期为生物制药废弃物的可再生利用提供理论依据。1)以阿卡波糖药物生产后的废渣为研究材料,在单因素实验的基础上通过响应面法优化磷壁酸去除方法,最佳工艺条件为加碱量6%(m碱/m菌泥=0.06),球料比15,转速300 rpm,球磨时间5 min。采用正交实验优化蛋白质去除方法,最佳工艺条件为转速300 rpm,SDS添加量17%,球料比15,球磨时间30 min。最终获得一条操作简单、时间短、成本低的肽聚糖提取路线。所得提取物经溶菌酶溶解实验、红外光谱检测、化学成分分析等证实为肽聚糖。2)以第一部分中所得提取物为原料,通过酶解和纯化获得可溶性肽聚糖组分SPG-1。对组分SPG-1进行免疫及抗肿瘤活性研究,结果如下:大鼠脾淋巴细胞增殖实验显示SPG-1对T、B淋巴细胞均具有明显增殖效果;巨噬细胞体外刺激实验显示可溶肽聚糖片段通过刺激巨噬细胞产生IL-10、IL-12、TNF-α因子从而起到免疫刺激作用;抗肿瘤实验结果显示SPG-1对HT29结肠癌细胞、Eca-109食道癌细胞和HepG2肝癌细胞均有较好的抑制作用。