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左乙拉西坦（Levetiracetam）,化学名为（S）-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺,是比利时UCB公司开发的新一代广谱抗癫痫药物,作用机制新颖独特,具有治疗指数高、起效迅速、副作用轻、耐受性好、良好的药动学特性等优良特性,而且能够预防癫痫发病。左乙拉西坦疗效好而且市场前景广阔,因此建立高效、绿色环保的合成工艺成为近年来的研究热点。（S）-2-氨基丁酰胺是合成左乙拉西坦的关键手性中间体,本文筛选获得立体选择性D-氨基肽酶,为左乙拉西坦关键手性中间体的工业化生产奠定基础。本研究从Gluconobacter oxydans、Gluconobacter thailandicus中克隆得到D-氨基肽酶基因,成功构建重组工程菌E.coli BL21（DE3）/pET28a-Go-Dap、E.coli BL21（DE3）/pET28a-Gt-Dap。进一步通过同源序列比对筛选获得来源于Brucella sp.F23/97的D-氨基肽酶,成功构建重组工程菌E.coli BL21（DE3）/pET28a-Bs-Dap。以构建的重组工程菌E.coli BL21（DE3）/pET28a-Bs-Dap为研究对象,通过镍柱亲和层析分离纯化获得重组D-氨基肽酶Bs-Dap,并进行酶学性质研究。结果表明,最适温度35?C,最适pH 8.0,金属离子及EDTA对酶活促进作用不明显或一定程度上抑制酶活,动力学参数研究表明该酶对2-氨基丁酰胺的米氏常数Km=15.1 mM,最大反应初速率Vmax=476.2 U/mg。研究重组工程菌E.coli BL21（DE3）/pET28a-Bs-Dap静息细胞立体选择性水解2-氨基丁酰胺的催化条件。研究表明,最优的催化条件为:转化温度35?C,最适pH 7.5（Tris-HCl缓冲液）,2-氨基丁酰胺浓度300 g/L,菌体浓度0.8 g DCW/L,在上述催化条件下转化2 h后（S）-2-氨基丁酰胺得率为48.2%,光学纯度大于99.9%。上述研究结果表明,重组工程菌E.coli BL21（DE3）/pET28a-Bs-Dap能够立体选择性催化高底物浓度的2-氨基丁酰胺,具有工业化生产应用的潜力。