目的胃癌是世界上第二位的常见恶性肿瘤。因此，研究胃癌发生发展的机制，对防治胃癌及癌前病变具有非常重要的意义。碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)与肿瘤发生发展的关系极为密切。非甾体抗炎药(NSAIDs)可降低胃肠道肿瘤发生的危险性，成为近年来肿瘤防治领域的又一研究热点。celecoxib是非甾体抗炎药的一种，目前celecoxib对BGC-823胃癌细胞株凋亡的影响机制不清。本实验采取外源性bFGF和celecoxib(环氧合酶-2选择性抑制剂)作用于胃癌BGC-823细胞，观察其对胃癌BGC-823细胞株的生长，PKB活性，环氧合酶-2(cyclooxygenase，COX-2)、核转录因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表达变化的影响以及PI3K／PKB信号转导通路在此过程中的作用，以探讨bFGF和celecoxib在胃癌发病机制及防治胃癌中的作用和bFGF与celecoxib之间的相互作用影响。方法1荧光显微镜观察celecoxib对胃癌BGC-823细胞株凋亡的影响。2 MTT比色法观察bFGF、PKB上游激酶PI3K抑制剂wortmannin、celecoxib对胃癌BGC-823细胞株增殖的影响。3流式细胞术检测celecoxib诱导胃癌BGC-823细胞株凋亡。4 Western blot方法检测bFGF对PKB的活化作用，bFGF和celecoxib诱导的COX—2、N—κB、VEGF表达变化。结果1 bFGF对PKB活性的影响：不同浓度bFGF诱导BGC-823细胞PKB活性增高，经25ng／ml bFGF诱导后磷酸化PKB表达量最大。25ng／ml bFGF与BGC-823细胞共同孵育5，10，30，60min，PKB活性在bFGF作用5min时开始升高，作用10min时达到高峰，其后活性开始下降，但均高于空白对照，各bFGF处理组与对照组之间差异具有统计学意义(P＜0.05)。经wortmannin预处理后，胃癌BGC-823细胞PKB活性与未经预处理组相比降低，且差异显著(P＜0.05)。2 MTT比色试验：显示bFGF有明显的促进BGC-823细胞增殖的作用(P＜0.05)。celecoxib具有明显的抑制BGC-823细胞增殖的作用，且呈明显的剂量依赖性(P＜0.05)。3细胞形态学观察加入不同浓度的celecoxib后，光镜下细胞形态发生明显变化，部分贴壁细胞收缩变圆，漂浮。荧光显微镜观测显示celecoxib处理后，细胞形态不规则，随时间和药物浓度的增加，出现凋亡细胞。4流式细胞术celecoxib作用24h可明显诱导BGC-823细胞发生凋亡，与药物浓度成正相关(r=0.99，P＜0.01)。对照组、25、50μmol／L组的细胞凋亡率分别为2.39％、33.69％、59.98％。5 Western印迹分析Western印迹分析显示，bFGF能时效地诱导BGC-823细胞的COX-2、NF—κB、VEGF蛋白表达量增加。其中COX—2在24小时、NF—κB在12小时和VEGF在24小时分别表达量达到高峰，各bFGF作用时间点与对照比较结果有显著性差异(P＜0.01)。加入celecoxib后western印迹分析结果可见随着药物浓度的升高COX—2、NF—κB、VEGF蛋白表达水平逐渐降低，具有剂量依赖性。与对照组相比25、50μmol／L组中COX—2、NF—κ3、VEGF蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.01)。COX—2、NF—κ3、VEGF之间具有相关性(r分别为0.852，0.908和0.930P＜0.01)。celecoxib对由bFGF诱导的BGC-823细胞中的COX—2、NF—κB、VEGF蛋白表达有抑制作用(P＜0.01)。结论1、在胃癌BGC-823细胞中，bFGF经PI3K／PKB通路介导促进增殖、抵抗无血清饥饿诱导的凋亡。2、bFGF诱导胃癌BGC-823细胞PKB活性增高，其抑制剂wortmannin可阻断此诱导作用。3、bFGF依赖PI3K／PKB通路促进胃癌BGC-823细胞中COX—2、NF—κB、VEGF蛋白表达。4、celecoxib可促进胃癌BGC-823细胞的凋亡，降低胃癌BGC-823细胞中COX—2、NF—κB、VEGF蛋白表达。5、celecoxib可以抑制bFGF对胃癌BGC-823细胞增殖的作用。