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背景与目的:子宫肌瘤是妇科常见的良性肿瘤,子宫肌瘤最主要的临床表现是异常子宫出血、盆腔痛和贫血,其对女性生活质量的影响不容忽视。国外有研究报道子宫肌瘤中中介体复合物亚基12(Mediator complex subunit 12,MED12)基因的高频突变,其中约70%的子宫肌瘤患者病灶组织中存在该基因突变,且大部分(>90%)位于MED12基因的第44位甘氨酸(MED12 p.G44)。本研究为了确定子宫肌瘤患者的MED12基因突变谱,对MED12好发突变的区域进行大规模测序;并且构建MED12基因野生型和突变型质粒,通过转染至293T细胞,继而检测293T细胞的活力、侵袭、迁移、凋亡及周期情况,在细胞水平上探索MED12基因突变对子宫肌瘤的发生发展的影响。方法:首先从322名单、多发性子宫肌瘤患者中收取362个肌瘤样本,提取子宫肌瘤组织总DNA,进行PCR扩增,然后进行测序、序列比对,找出潜在突变。然后构建pCMV6-hMED12-DDK质粒,并将质粒转染至293T细胞。分为4组:(1)空载质粒,(2)空白细胞,(3)MED12突变型,(4)野生型,使用Western blotting(WB)检测MED12蛋白的表达;CCK8法检测细胞活力;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞法检测细胞的凋亡水平;PI染色法检测细胞周期。结果:通过测序证明子宫肌瘤患者的362个样本中,158例MED12突变(43.6%);第44位甘氨酸(G)突变为天冬氨酸(D)的比例最高(18.5%)。本研究中并未发现MED12L的突变。MED12的突变与各项临床特征无相关。利用CCK8法检测发现MED12的突变型(G44D)能够提高293T细胞活力,且有统计学差异(P<0.01),然而细胞凋亡及细胞周期并无统计学差异。结论:1.本研究中发现子宫肌瘤中存在高频率的MED12基因突变(43.6%,158/362),MED12突变较少发生于相邻的子宫肌层。此外并未发现子宫肌瘤患者中存在MED12L突变。2.MED12突变在多发性子宫肌瘤不同瘤体中具有不同的突变形式,表明多发性子宫肌瘤中不同瘤体的起源不同。3.MED12可能通过影响细胞活力而促进子宫肌瘤的发病。