临床研究表明，大多数急性冠脉事件发生于动脉粥样硬化(AS)基础上，狭窄程度为轻至中度的病变。斑块破裂是引起急性冠脉综合征的关键。病理学研究表明粥样斑块易破裂区常有大量单核细胞源巨噬细胞浸润，通过泡沫细胞化形成富含脂质的易损斑块；分泌蛋白溶解酶降解细胞外基质削弱纤维帽而促使斑块破裂。CD36抗原是一种多功能受体，它既是粘附分子，又是清道夫受体，可能参与单核细胞与血管内皮细胞的粘附以及单核细胞泡沫化。过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR_γ)属于核受体超家族中PPARs家族的成员，是配体依赖性的转录因子，也是胰岛素增敏剂的分子靶，它不但参与脂肪和糖代谢、脂肪细胞分化和成脂作用，还是炎症反应的重要介质，通过多个途径影响AS形成和斑块的稳定性。CD36启动区有PPAR_γ作用位点，PPAR_γ和配体可能通过转录诱导单核细胞／巨噬细胞表达CD36、增加对脂质摄取。因此，PPAR_γ可能既是AS病变变化的标志，也是改善胰岛素抵抗、防治心血管事件新的治疗靶点。 本研究试图通过检测膜受体CD36及核受体PPAR_γ在单核细胞／巨噬细胞与血管内皮细胞粘附吞噬脂质形成早期富含脂质的粥样斑块；以及在斑块破裂后引起的急性冠脉事件中表达水平的变化，力图从多层次、多方面探讨膜受体CD36及核受体PPAR_γ在不稳定斑块形成、破裂中的作用及其相互关系和他汀类药物的影响。 主要研究方法： 采用体外、体内实验相佐证，从分子、细胞、动物实验和临床结合进行了观察。主要应用原位核酸分子杂交法，免疫组化ABC法，流式细胞仪技术，RT-PCR技术、Western印迹法，粘附实验，纯系小鼠动脉粥样硬化模型、电镜技术，血管内皮细胞、U937细胞体外培养模型、临床病例分析等方法进行研究。 主要研究结果： 1、建立纯系小鼠动脉粥样硬化模型：高脂饲养加Vitamin D负荷成年C57BL／6纯系小鼠14周。14周后成模型小鼠改喂普通饲料，并加普伐他汀钠(10mg／kg／d)或盐酸吡格列酮(10mg／kg／d)干预，共8周。观察体重，血脂、血糖及胰岛素水平；并取不同时间段(0、4、8、14、22周末)主动脉血管，油红O染色观察病理学变化、免疫组化及原位杂交法检测主动脉内膜CD36与PPAR_γ受体表达。0-14周，小鼠体重及血脂、血糖和胰岛素水平逐渐升高，但12周后体重下降。两种药物干预组血脂、血糖及胰岛素水平均下降。主动脉血管内膜油红O染色显示，8、14周所取标本，血管开口处内膜着色逐渐加深、局灶性红染。免疫组化显示：AS对照组：主动脉壁粥样硬化灶内均可见阳性的棕黄着色；另可见内膜及内膜下局灶性黄染；药物干预组：CD36和 PPARY在不稳定斑块形成中作用的研究 中文脉要阳性染色均明显减少；正常对照组未见阳性染色。两种受体分布及表达一致。CD36与 PPARY抗原 InRNA表达的原位杂交结果显示：AS对照组主动脉内膜及内膜下均见局灶性阳性蓝紫染色；药物干预组主动脉内膜阳性染色均明显减少；正常对照组偶见阳性染色。AS对照组切片随机计数显示两种抗原的阳性染色的积分均明显高于正常对照及药物干预组。2．CD36、PPARY抗原在细胞表达水平的变化与细胞脂质蓄积和细胞粘附的关系：经油红O染色光镜下观察及透射电镜下观察发现，。XLDL与U937细胞共同孵育能导致细胞内脂质颗粒增加与泡沫样变。普伐他汀钠能抑制该作用。western blot检测及粘附实验显示。XLDL与血管内皮细胞和U937细胞共同孵育后，CD36及PPARY水平明显升高，粘附作用增强，呈时间和浓度依赖性。普伐他汀钠干预后降低CD36及PPARY7k平，抑制U937细胞与血管内皮细胞粘附。3．冠心病患者＊＊6与2PA即抗原表达水平的变化：急性心肌梗死组M＊1）引例，不稳定性心绞痛组（UAP）14例，稳定性心绞痛组（AP）26例，对照组14例。用Becton－Dickinson流式细胞仪检测外周血单核细胞及血小扳膜受体CD36表达水平变化。结果：血小板膜上CD36的表达水平在各组间无显著差异，流式检测图形均为单峰。CD36的表达水平在外周血单核细胞上有明显的变化。在AMI组及UAP组呈双峰图形；在AP组和对照组则为单峰图形。剔除年龄、血糖、血脂的影响后，AMI组CD36的表达量（26．m土m卫2％），与UAP组门2．94土n84％）无显著差异；而与AP组门4．22姚刀7％）仍有显著的差异；与对照组臼96LI．75％）仍有非常显著的差异。标本处理时间延迟，外周血单核细胞CD36表达水平几乎无变化。 用 RTPCR法检测外周血单核细胞 CD36、PPARY抗原 mRNA表达水平变化。分别以 CD36抗原瓜actin和 PPARY抗原小－actin光密度比值表示 CD36与 PPAR抗原InRNA表达水平。用年龄、血脂、血糖对各组光密度比值的均数进行修正后，AMI组（分别为：CD36，0．731土0二72；PPARY，0．404土0．186）和 UAP组（分别为：CD36，0．634土0二58；PPARY，0．339土0＊65）表达水平仍显著高于 AP组（分另为：CD36，0．＊0土0二co；P PAPA枷，0．22土0＊33）和对照组（分别为：＊m6，0＊57土0＊7＊P PAPAN，O二08切刀3，…功刀5卜＊＊I组高于＊＊P组，但差异没有显著性；＊P组高于对照组，存在显著