RGD诱导人胃癌细胞BGC823凋亡及RGD-壳聚糖微球的制备和释药性能研究

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精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)三肽是一种重要的细胞识别位点与信号启动分子,存在于多种生物细胞外基质(Extracellular matrices,ECM)和血浆蛋白结构中,同时也是细胞间识别系统的基本单位,在肿瘤的治疗中起到十分重要的作用。它不但能够竞争性的封闭肿瘤细胞上的整合蛋白,使肿瘤失去对正常组织粘附的能力,从而抑制肿瘤转移,而且它还能够直接进入细胞,活化细胞凋亡途径末端的Caspase-3,从而引起结构蛋白和功能蛋白的降解,最终使细胞解体。因此含RGD的多肽或化合物有望成为治疗一些重要疾病的新制剂。本文研究了RGD对人胃癌细胞BGC823生长增殖的影响。MTT试验的结果表明RGD抑制了人胃癌细胞BGC823的生长增殖,并呈浓度依赖性。通过HE染色、透射电子显微镜、免疫组织化学、流式细胞术和凋亡细胞的DNA片断分析等方法观察凋亡细胞的形态结构变化以及定性、定量检测细胞凋亡。我们还深入的探讨了RGD作用后细胞内抗凋亡蛋白Survivin表达的变化。结果表明Survivin的表达量明显减少,这也暗示出RGD诱导人胃癌细胞凋亡的机制可能是抑制Survivin基因的表达。同时我们对RGD-壳聚糖微球的制备及其释药性能进行了初步探讨。通过乳化交联法制备了壳聚糖微球,对影响微球尺寸、形貌等指标的一系列因素进行考察,从而找出制备微球的适宜条件,得到尺寸均匀、稳定性好的空白微球。然后将RGD包埋进微球内,并且对其载药率、包封率及释放性能进行考察,发现包埋在微球内的RGD可以持续而稳定的释放。
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