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目的 本研究旨在探索葛根素对动物局灶性脑缺血与脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及机制,为葛根素治疗缺血性神经损伤提供理论依据。 方法1.60只雄性SD大鼠随机分为两组(每组30只):对照组及葛根素组。每组根据再灌注时间不同又分为缺血90min再灌注6、12、18、24、48及72h小组(n=5),葛根素组在栓塞大脑中动脉前10min经腹腔注射葛根素60mg/Kg,对照组则给予等容量生理盐水。所有动物均采用右侧颈动脉丝线栓塞大脑中动脉致局灶性脑缺血90min。应用HSP70单克隆抗体免疫组化染色检测大鼠再灌注6、12、18、24、48及72h脑皮质HSP70表达的变化;并与病理组织学改变进行对照研究。2.20只雄性新西兰大白兔随机分成对照组(n=10)及葛根素组(n=10),所有动物均阻闭腹主动脉肾下段20min,建立兔脊髓腰尾段缺血模型。葛根素组于阻闭前10min静脉注射葛根素30mg/Kg,对照组则静脉注射等容量生理盐水。测定阻闭前、后及再灌注后血浆中丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性、血栓素B2(TXB2)及6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的含量;再灌注4、8、12、24及48h分别 第四军医大学硕士学位论文对动物后肢运动功能评分;再灌注48h,处死动物,制作切片,观察其组织病理学变化。 结果1.对照组再灌注6h可见HSP70表达,至24h达高峰;葛根素组与对照组相比,于再灌注6、12、18、24、48h各时间点HSP70表达明显增多且表达高峰提前至再灌注后18h:光镜下,与对照组相比,葛根素组各时间点皮质神经细胞缺血性病理改变较轻,坏死灶较小。入缺血及再灌注后,葛根素组MDA值明显低于对照组(p<0刀5),而SOD活性却明显高于对照组(p<0.05);缺血2 omin及再灌注18h,葛根素组TXB。值明显低于对照组;而在缺血 2 omin,葛根素组 6十eto斗GF山含量明显高于对照组b刊.05)。再灌注后4、8、u、24及48h时的神经功能评分葛根素组明显高于对照组 …刊.05);光镜下,与对照组相比,葛根素组脊髓组织损伤显著减轻,形态基本正常的前角细胞较多。 结论1.葛根素能增加大鼠局灶性脑缺血诱导的HSP70表达及使表达高峰期提前,并能使皮质神经细胞缺血损伤减轻。2.葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤有显著的保护作用。保护机制与葛根素抗氧化损害的作用及改善缺血再灌注后血浆TXA厂PGI。平衡失调有关。