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引言：隐孔菌又名松橄榄，为多孔菌科隐孔菌[Cryptoporus volvatus（Peck）Schear]的子实体，作于公元15世纪的《滇南本草》上始有关于隐孔菌的记载，它具有舒筋活络，祛风除湿的功效。隐孔菌在民间用于气管炎和哮喘的治疗。但由于其野生资源有限，未得到广泛利用。我们采用发酵技术得到了大量的隐孔菌，理化分析发现其与野生菌株的成分完全一致。隐孔菌发酵物（cryptoporus volvatus ferment substance，CVFS）减轻抗原致敏攻击小鼠肺部嗜酸粒细胞浸润；体外给药抑制豚鼠气道平滑肌的Schultz-Dale反应；减轻抗原攻击豚鼠肺部慢反应物质的释放；及钙离子载体A23187刺激后大鼠肺部白三烯D4的释放。本实验将观察CVFS对哮喘速发相和迟发相的主要指标——致敏豚鼠抗原攻击后气道收缩，炎症细胞浸润、嗜酸粒细胞过氧化物酶（EPO）释放；并用隐孔菌多糖——从CVFS分离纯化的、分子量为15000道尔顿的低分子酸性多糖，测定其对离体嗜酸粒细胞趋化的影响，探讨隐孔菌对哮喘的影响及作用机制。 目的：观察CVFS对致敏豚鼠抗原攻击后气道收缩，嗜酸粒细胞气道浸润，嗜酸粒细胞过氧化物酶（EPO）释放以及隐孔菌多糖（cryptoporus polysaccharide，CP）对离体嗜酸粒细胞趋化的影响。 方法： 1．采用整体试验法观察CVFS对卵白蛋白致敏攻击豚鼠机械肺功能的影响。 2．采用整体试验法观察CVFS对卵白蛋白致敏攻击大鼠气道炎症模型支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluids，BALF）中炎症细胞的影响。 3．采用整体试验法观察CVFS对卵白蛋白致敏攻击豚鼠气道炎症模型BALF中EPO的影响。 4．采用离体试验法观察隐孔菌多糖对血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）趋化嗜酸粒细胞的影响。 结果： 1．对致敏豚鼠气道阻力（RL）和肺顺应性(Cdyn)的影响： CVFS灌胃能明显减少致敏豚鼠卵白蛋白抗原攻击后1-30 min RL增加值，模型组1-30浙江大学硕士学位论文 隐孔菌对哮喘豚鼠气道收缩、嗜酸粒细胞释放和趋化的影响minR。平均增力值为（17二8土54石）％，而CVFSO．3g·kg’、0．gg·kg’和2．7g·kg‘130minRL平均增加值分别为（149．4d6．8）％、（】194士12．1）％、（115．5土6．3）％；抑制率分别为、刊．8％、74．4O（＜0．05）、79．6o（＜0．05）。CVFS灌胃能明显减少致敏豚鼠卵白蛋白抗原攻击后 1－30min Cw减少值，模型组130 min Cdyn平均减少值为（31．4上19＊）％，而CVFS 0．3 g·kg’、0．9g·kg’和2尸g·kg’130 min COW平均减少值分另为（24二土12．3）％、（18．7ilo．l）％、（l．5士门．7）％，抑制率分别为22．9％、40．5％厂＜O．01)、66．5％（P＜0刀1）。2．对大鼠气道炎症模型BALF中炎症细胞的影响： 模型组经 1刀％卵白蛋白 7次攻击后，与致敏不攻击的大鼠比较，白细胞总数：J嗜酸粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞明显增多，致敏大鼠抗原攻击有非常明显的过敏性炎症反应。CVFS y剂量依赖抑制致敏大鼠抗原攻击后 BALF中嗜酸粒细胞升高，CVFS 0．ig·kg“‘，0．3＊吨＊，0．gg·吨l，2．7g·吟＊中的白细胞总数分别为3．18土1＊6，2．54土0＊5，1．78土0＊9，1、64t 0．76，而模型组为（3．84t 2．42）xlo’／ml；CVFS 0．ig·kg1，0．3 g·kgJ，0．9 g·kg＼2＊g·k：’中的嗜酸粒细胞总数分别为 0．4410．49，0．27t 0．19，0．12t 0．15，0．07t 0．06，而模型组为（0尸4土 0．66）x 10’／mlo抑末白细胞总数ID。。（95％可信＊）二1．11（0厂3～1．70）g·kg”，抑制嗜酸粒细胞ID＊口（95％可信限）一0．15（0．11～0．ZI）g·kg”’口3、对BALF中EPO的影响： CVFS灌胃能明显抑制抗原致敏攻击豚鼠支气管肺灌洗液中 EPO的增多。CVFS 0．3g·kg”’、0．9 g·kg”’和 2．7 g·kg＊与模型组比较，EPO在紫外光 490 urn处的吸光度分别减少3．1％，16，9％（＜0刀5）和20．1％（＊＜0刀1人阳性对照药酮替芬5 mg·吨减少值为19．0WP＜0刀1）。4．对嗜酸粒细胞趋化反应的影响 隐孔菌多糖能明显抑制pAF对嗜酸粒细胞的趋化作用。4X10””～4X10’mol·L‘pAF对嗜酸粒细胞的趋化作用呈钟型反应曲线，较 RPMll 640的作用增加 l．2、l．6、2．0、4．5、1．9、0．8倍DWZxlo 凶‘，Zxlo一’，Zxlo“，Zxlo“’g·L’的隐了菌多糖对趋化作用最强的4x10一’mol·L”’的PAF的抑制分别为6．8O、17．20（P＜0．05）、29．6O（P＜0．of）、35．9o（P＜0．of）。结论：1．CVFS对卵白蛋白致敏攻击豚鼠机械肺功能有明显的改善作用。2．CVFS对卵白蛋白致敏攻击形成大鼠气道炎症模型中炎症细胞和嗜酸粒细胞的浸润有明 显的抑制作用。3．CVFS对卵白蛋白致敏攻击形成豚鼠气道炎症模型中BALF内EPO的活性有抑制作用。4．隐孔菌多糖对血小板活化因子趋化嗜酸粒细胞有抑制作用。5．隐孔菌可能通过作用于嗜酸粒细胞达到抑制哮喘的作用。