多磷酸肌醇激酶MoAsp1在稻瘟病菌中的功能研究

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水稻是我国原产历史最悠久的粮食作物,也是世界最主要的粮食作物之一。全世界有近三分之一的人口以大米为主食,水稻对世界人民粮食民生问题的重要性可见一斑。稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病作为世界三大水稻病害之一,其流行之广、危害之大,无时无刻不牵动着世界研究者的眼球。目前,世界主流的防治方法是水稻品种改良和化学防治,但是由于稻瘟病菌的广泛传播,极易引起病菌致病型突变以及抗药性群体快速扩张,导致目前稻瘟病防治战略举步维艰。因此,世界稻瘟病研究者都在积极寻找,能够从致病机制方面根治稻瘟病的方法,从而为世界粮食病害提供新的防治策略,同时为新型杀菌剂的开发提供候选靶标。本论文主要对多磷酸肌醇激酶在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能进行分析,研究结果如下:在酵母的研究中发现,酵母Vip1通过对多磷酸肌醇(IP6)的磷酸化作用直接参与细胞内焦磷酸肌醇(IP7或IP8)的合成,后者是多种细胞过程的胞内高能信号分子。本文的研究在稻瘟病菌体内鉴定到一个酵母VIP1的同源基因MoASP1,经过预测,发现该基因氨基端具有保守的”rimK”ATP-grasp功能域和一个羧基端类磷酸酶功能域。通过对基因敲除突变体表型分析我们发现,与野生型Guy11及基因互补菌株相比,突变体菌株的营养生长、无性繁殖和致病力均受影响。同时,突变体菌株对细胞壁胁迫和氧化胁迫的应答能力也异常于野生型。这说明MoASP1基因对稻瘟病菌的生长发育起着重要作用。酵母Vip1及一些同源蛋白已被报道出主要是通过影响微管细胞骨架这一保守的生物学特征来参与真菌的生长发育。其中,由Vip1参与合成的焦磷酸肌醇对+Tips蛋白复合体的中心——EB1家族蛋白的调控作用具有浓度依赖性和胞内环境依赖性,EB1蛋白对微管尖端及尖端蛋白起着关键作用。在本文对稻瘟病菌MoAsp1敲除突变体的研究中,发现MoAsp1对微管蛋白同样具有调控作用,并以此影响稻瘟病菌的极性生长,从而引起突变体致病能力下降。
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