脑脉通联合骨髓间充质干细胞移植对脑缺血再灌注大鼠巢蛋白表达的影响

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengxiaogang
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  目的:   1 以 SD 大鼠为研究对象,在前期成功制备线栓阻塞大鼠大脑中动脉制备局灶性脑缺血动物模型的基础上,通过对脑缺血再灌注大鼠神经功能、脑梗死面积的观察,评价脑脉通、BMSCs 移植及其联合对脑缺血损伤的保护作用。   2 通过免疫组织化学法、Western blot 免疫印迹法测定脑缺血再灌注大鼠脑组织内巢蛋白的表达及其相对含量水平变化,研究脑脉通、骨髓间充质干细胞移植及其联合促进神经细胞再生的作用机制。   方法:   1 参考改良的 Longa 法制备大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血动物模型( MCAO)。选取 190 只健康清洁级 SD 大鼠,雌雄各半, 3 月龄,体重 300 ±50g,随机分为假手术组 10 只、模型组 45 只、BMSCs 移植组 45 只、脑脉通组 45 只、BMSCs 移植联合脑脉通组 45 只,除假手术组外,模型组和给药组根据取材时间点不同又可分为模型 7d 组、14d 组及 28d 组各 15只、移植 7d 组、14d 组及 28d 组各 15 只、脑脉通 7d 组、14d 组及 28d组各 15 只、联合 7d 组、14d 组及 28d 组各 15 只。其中假手术组及模型组给予同等容积的生理盐水灌胃,模型组颈内动脉给予和 BMSCs 移植组同等容积的生理盐水;BMSCs 移植组分别于术前 4d 给予和中药同等容积的生理盐水灌胃,再灌注后 24h 颈内动脉给予 BMSCs 悬浮液;脑脉通组分别于术前 4d 给予脑脉通,再灌注后 24h 颈内动脉给予生理盐水;脑脉通联合 BMSCs 移植组分别于手术前 4d 给予脑脉通,再灌注后 24h 颈内动脉给予 BMSCs 悬浮液。   2 每只大鼠分别于术后 48h 以及术后 7d、14d、28d 评测神经功能,术后7d、14d、28d 取材,应用免疫组织化学法、Western blot 蛋白免疫印迹法从蛋白水平观察各组大鼠脑组织中巢蛋白的表达以及相对含量的变化,结合图像分析技术及统计学分析进行结果分析。   3 运用上述方法,从脑组织巢蛋白的表达及相对含量变化等方面,研究脑脉通、骨髓间充质干细胞移植及其联合促进神经细胞再生的作用机制。   结果:   1 各组大鼠的神经功能综合评分和脑组织梗死面积比较   1.1 各组大鼠神经功能综合评分比较假手术组大鼠神经功能综合评分较模型组各时间点显著增高( P<0.01);模型组 28d 神经功能评分较其14d 组、7d 组增高( P<0.05),与模型组相比,移植组 28d 神经功能评分显著增高( P<0.01),脑脉通及联合 7d 组、14d 组、28d 组神经功能评分增高( P<0.01,P<0.05),其中联合 28d 组分别较移植 28d 组及脑脉通 28d组增高( P<0.01);移植 28d 组、14d 组较其 7d 组增高( P<0.05),脑脉通 28d 组较其 7d 组增高( P<0.05),联合 28d 组均较其 7d 组和 14d 组增加(P0.05) ,脑脉通组和联合组各时间点大鼠脑梗死面积较模型组显著减小(P
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