减体肝移植后受体来源骨髓干细胞跨分化的实验研究

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目的 肝组织再生是肝脏对损伤修复反应的基本特征,为肝脏对损伤或对功能调节的精细协调性增生反应。由于肝脏强大的再生能力,小体积减体肝移植才得以成功开展以弥补移植领域供体器官来源的不足。在肝脏组织缺损后,除成熟肝细胞能大量增生以外,已经证明某些前体细胞或干细胞能衍化成肝细胞,这些细胞主要来自肝内卵圆细胞和来自肝外的骨髓造血干细胞。已有一些动物实验研究阐述了造血干细胞在机体非造血组织损伤修复细胞分化中的作用,但关于减体肝移植后造血干细胞在肝组织中的分化,目前还未阐明。本实验旨在研究大鼠减体肝移植后受体来源的造血干细胞在肝组织中跨分化的可能性以及部分相关影响因素,为促进减体肝移植后肝细胞再生提供新的思路应用前景。 方法 首先采用LEWIS大鼠同基因原位肝移植模型观察30%部分肝移植后肝脏增生的动态过程,应用免疫组织化学技术对肝脏细胞增生的时相性进行观察。采用性别交叉雌性到雄性大鼠肝移植模型进行30%,60%及100%不同大小移植物同基因原位肝移植。应用NASDCL特殊染色检测肝脏中前体细胞的数量,观察受体来源骨髓干细胞在肝脏中的募集,同时利用免疫荧光原位杂交技术检查移植肝脏中受体来源Y-染色体阳性的肝细胞数量,观察不同大小移植物、缺血损伤及G-CSF对部分肝移植后受体来源骨髓干细胞在肝脏中跨分化的影响。 结果 1.30%减体肝移植后再生肝脏的重量在术后三天达到大约原肝的
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