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目的:6-姜酚是姜中最主要的酚类物质,也是姜发挥药理作用的主要成分之一。已有研究表明6-姜酚能以硫酸化的方式排出体外,本研究旨在:1)确定人胞质磺基转移酶(SULT(s))是否能够介导6-姜酚的硫酸化反应或是某些SULT(s)能介导此反应,并通过研究不同的底物(6-姜酚)浓度与反应速率的关系得出相关酶的米氏动力学常数;2)6-姜酚能否在体外培养的人肝癌细胞(HepG2)和人结肠腺癌细胞(Caco-2)里发生硫酸化反应;3)6-姜酚能否在人体器官肺、肝、小肠和肾的组织匀浆里发生硫酸化反应;4)确定3’-磷酸腺苷-5’-磷酸硫酸酯(3′-phosphoadenosine5′-phosphosul-fate,PAPS)是与6-姜酚的某个羟基或是两个羟基发生了硫酸化反应。方法:用克隆、表达并纯化的13种人胞质磺基转移酶(SULT1A1,SULT1A2,SULT1A3,SULT1B1,SULT1C2,SULT1C3,SULT1C4,SULT1E1,SULT2A1,SULT2B1a,SULT2B1b,SULT4A1,SULT6B1)催化硫酸化反应;用放射性35S标记的PAP35S作为硫酸化反应中硫酸酯的供体,并通过追踪35S确定硫酸酯的去向;薄层色谱分析(TLC)法和放射显影等方法分离和观察硫酸化产物;计算放射性活度来衡量硫酸化反应的强度;利用质谱分析的方法确定硫酸酯化是在6-姜酚的某个羟基。结果:1)SULT1A1,SULT1A2,SULT1A3,SULT1B1,SULT1C4和SULT1E1能介导6-姜酚的硫酸化反应;2)SULT1A1是介导该反应的关键酶;3)6-姜酚能在HepG2和Caco-2细胞中代谢为硫酸化的6-姜酚;4)6-姜酚能在人肺、肝、肾和小肠的组织匀浆中代谢为硫酸化的6-姜酚;5)小肠和肝被证明是主要硫酸化代谢6-姜酚的器官;6)PAPS中的硫酸酯是与6-姜酚中的酚羟基发生硫酸化反应。结论:该实验结果为6-姜酚在体内外的硫酸化代谢提供了有用信息,为临床上更合理的应用6-姜酚提供了理论依据。