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目的鼻咽癌系我国高发的头颈部恶性肿瘤,具有家族及地区聚集性。临床上,就诊的患者大多已为Ⅲ,Ⅳ期,单纯的放射治疗已经不能满足治疗需要,化疗作用有限,需要新的治疗药物出现。鼻咽粘膜的正常组织与癌组织中都有c-Src的表达,癌组织中表达明显增高,且鼻咽癌组织中c-Src表达分别与其与临床分期、预后不良密切相关。故Src也可以作为NPC全身治疗的一个潜在靶点。Src激酶家族系非受体酪氨酸蛋白激酶,其家族成员已发现有9个,这些产物都是具有蛋白酪氨酸激酶活性的蛋白质。它们由特殊结构域组成,分子构型极其相似,参与多条细胞信号转导途径,对细胞的生长,分化,增殖,迁移等生理过程均能发挥重要的作用。其中Src作为人类首先发现的原癌基因c-Src编码的蛋白激酶,其活化与多种人类恶性肿瘤发生及复发转移相关。因此,Src激酶被作为一个治疗癌症的重要靶点,Src激酶抑制剂可能为癌症的治疗提供新的方法。本研究旨在研究Src激酶抑制剂达沙替尼在体外对鼻咽癌细胞的抑制作用。方法选择人鼻咽癌细胞系CNE2,应用不同浓度的达沙替尼处理,分别使用Western blot分析蛋白及磷酸化蛋白表达水平,MTT法绘制细胞生长曲线,AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡及Transwell细胞迁移实验,了解达沙替尼应用后,NPC细胞增殖,凋亡及迁移能力的变化。结果1)应用不同浓度的达沙替尼处理细胞后发现,随着药物浓度的增高,鼻咽癌细胞的增殖能力呈现出被抑制效应明显增强的现象。2)随着药物浓度的增加,phospho-AKT (Ser473)、 phospho-MEK (ser217/221)、phospho-ERK (tyr204)的蛋白水平呈现明显的降低趋势,提示达沙替尼主要抑制MAPK 和 PI3K/AKT信号通路的活性,从而抑制细胞的生长及增殖。3)随着达沙替尼的浓度增加,发现达沙替尼抑制Src的磷酸化活性的能力明显增强,但对Src的总蛋白影响不大。4)达沙替尼能够明显浓度依赖性地诱导细胞发生晚期凋亡,即PI和AnnexinV染色双阳性的细胞比例明显增加。5)达沙替尼在体外能抑制FAK的磷酸化水平,使FAK-SRC复合物的活性显著减弱,从而明显抑制鼻咽癌细胞的迁移能力,且呈浓度依赖性。结论在我们的研究中发现,达沙替尼能通过减少Src激酶磷酸化的水平,使得下游信号转导通路MAPK和PI3K/AKT的活性受到抑制,抑制细胞增殖,诱导凋亡。此外,达沙替尼还能够抑制SRC-FAK复合体的形成,减弱细胞与细胞周围基质之间的黏附作用,从而抑制鼻咽癌细胞的转移。本研究为Src激酶抑制剂Dasatinib将来进一步应用于动物实验,及最终应用于临床治疗晚期鼻咽癌,提供了开端及有力的实验依据。