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常温保存猪精液是生猪生产中人工授精的首选。精液体外保存过程中,随着保存时间延长,精液中活性氧不断累积、微生物不断生长繁殖,ROS的积累会使精子产生氧化应激并攻击精子膜上的多不饱和脂肪酸,造成精子质膜和顶体损伤,微生物的生长繁殖也会造成精子凝集和损伤,影响精子活性及受精能力。没食子酸(GA)是一种天然酚酸,有较强的抗氧化性,已被批准可以作为食品中抗氧化剂使用,除抗氧化以外没食子酸还具有抗菌能力,对大肠杆菌等革兰氏阴性菌有显著的抑制作用。本研究在BTS稀释剂中添加不同浓度没食子酸(0、5、7、9、11 mg/L)对新鲜猪精液进行稀释,分装后按组别保存于17℃恒温箱,在不同时间利用显微镜及计算机辅助精子分析仪测定精子活率、A+B级精子率,使用试剂盒检测精子膜完整率、线粒体膜电位、抗氧化能力、抗氧化酶等,并测定不同保存时间精液中的微生物含量,探究没食子酸对猪精液常温保存的效果,筛选出最适添加浓度,并与经典抗氧化剂维生素C和抗生素庆大霉素进行抗氧化和抗菌性对比。本研究获得以下主要结果:1.在猪精液中加入不同浓度(0、5、7、9、11 mg/L)的没食子酸,不同浓度没食子酸对猪精液有不同程度的保护作用,其中,9 mg/L的没食子酸其效果最好,能显著提高保存后精子活率、A+B级精子数、质膜和顶体完整性、线粒体模电位(P<0.05),精子活率在保存第10 d活率达到62.9%极显著高于对照组(P<0.05),延长了常温下精液的保存时间。此外,9 mg/L的没食子酸能显著提高精液中总抗氧化水平(P<0.05),并显著降低精液中活性氧和脂质过氧化产物含量(P<0.05),因此,没食子酸在精液常温保存中的最佳添加浓度为9 mg/L。2.在精液中添加没食子酸和维生素C都可以起到改善精液保存质量的作用,精子活率、质膜和顶体膜完整率都有提高,但没食子酸组精子子活率、A+B级精子数、质膜和顶体完整率在5-10 d都显著高于维生素C组(P<0.05)。没食子酸组组精液中SOD、CAT等抗氧化酶的活性在保存后期都显著高于维生素C组,ROS和MDA含量也显著低于维生素C组;9 mg/L没食子酸组线粒体膜电位在保存第5-10 d也显著低于维生素C组(P<0.05),极显著低于空白对照组(P<0.05)。3.在精液中添加没食子酸和庆大霉素其活率和顶体膜完整性在保存1-3d效果不显著(P>0.05),5-10 d,9 mg/L没食子酸保存效果显著高于其余组(P<0.05),质膜完整性在保存第3-10 d,9 mg/L没食子酸保存效果显著高于庆大霉素组,庆大霉素组显著高于空白组(P<0.05)。没食子酸组精液中细菌含量与空白组无明显差异(P<0.05),显著高于于庆大霉素组(P<0.05)。综上所述,精液中添加没食子酸、维生素C及庆大霉素都能显著提高猪精液常温保存质量,没食子酸对猪精液的保护作用及抗氧化能力强于维生素C,精液有效保存时间延长至第10 d,活率达到63.07%。对精子有保护作用浓度范围内的没食子酸对精液中的细菌含量无显著抑制作用,且细菌含量显著低于庆大霉素组