人胶质母细胞瘤是最常见、恶性度最高的颅内肿瘤,占所有颅内肿瘤的15%,约占胶质瘤(包括星形细胞瘤、胶质母细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜肿瘤以及起源不明或混合起源的神经胶质瘤)的50%。胶质母细胞瘤患者普遍预后差、生存期短:外科手术切除肿瘤辅以放射、抗肿瘤药物的治疗条件下,该疾病患者中位生存期仅为14.6个月,中位无进展生存期仅为6.9个月。预后差、生存期短的重要原因之一为术后的化疗过程中由于肿瘤对以替莫唑胺为主的化疗药物不敏感而形成化疗药物抵抗,导致肿瘤复发,恶化预后。随着分子生物学对于包括胶质母细胞瘤在内的恶性肿瘤的药物抵抗机制和药物抵抗相关基因、蛋白质的研究不断地深入,一些与恶性肿瘤药物抵抗相关的修复基因日趋明朗。近年来研究发现,修复基因hMSH6是DNA错配修复基因系统的主要成员之一,作用是在细胞复制或转录过程中特异性识别错误配对的碱基,进而切除并加以修复,以保证DNA复制的高度忠实性,维持基因组的稳定性,在恶性肿瘤药物抵抗机制中扮演重要角色。目前,修复基因的表达在恶性肿瘤临床、特别是预后方面的研究也逐渐兴起。修复基因hMSH6及其表达蛋白的发现为胶质母细胞瘤的临床预后预测、未来抗肿瘤药物的研发提供了新的思路。目的:本研究拟通过回顾性分析,收集30例经病理学证实的原发性胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)患者手术切除的肿瘤标本。免疫组织化学染色方法检测修复基因hMSH6在原发性胶质母细胞瘤患者的肿瘤标本切片中的表达情况,结合患者基本情况以及临床资料,经过筛选、验证,寻找影响原发性胶质母细胞瘤术后生存、预后的相关因素。探讨胶质母细胞瘤的诊断、治疗方法以及错配修复基因hMSH6与原发性胶质母细胞瘤预后的生存相关性分析,为原发性胶质母细胞瘤患者的临床病情判断和术后预后提供理论依据,并可能为胶质母细胞瘤未来的治疗方式、抗胶质母细胞瘤的化疗药物研发提供新的思路。方法:1、本研究通过病案系统搜集、电话随访等方式获得30例原发性胶质母细胞瘤患者完整的基本资料和临床资料(年龄、性别、住院号、籍贯、家庭住址、联系电话、术前KPS评分、手术切除方式、磁共振图像上水肿程度、术后生存时间等)以及术中切除的肿瘤病理标本。2、通过免疫组织化学染色方法(两步法)检测hMSH6在胶质母细胞瘤患者病理标本中的表达水平,并用图像采集系统记录。3、应用SPSS 17.0统计学分析处理软件,应用Pearson卡方检验分析hMSH6高表达组和低表达组患者的临床基本特征(年龄、性别、术前KPS评分、手术切除方式、磁共振图像上水肿程度、术后生存时间等)之间的关系;应用Cox回归比例风险模型分别进行单变量和多变量分析,筛选出对胶质母细胞瘤预后有影响的独立变量;用Kaplan-Meier法和log-rank检验分析、比较独立变量条件下的生存时间差异性,并绘制Kaplan-Meier生存曲线图。(以上计算结果假设检验当P<0.05时认为差异具有统计学意义)结果:(1)30例胶质母细胞瘤患者中,男性18例,女性12例,男女性别之比为1.5:1。年龄25~83岁,平均55.4岁,中位发病年龄58岁。术前KPS评分60~90分,中位术前KPS评分80分。手术切除方式:20例胶质母细胞瘤患者采取全部切除术,9例行次全切除术,1例行部分切除。生存时间3~38个月不等,平均15.1月,中位生存时间为13个月。(2)30例胶质母细胞瘤标本切片中,hMSH6阳性总表达率达86.7%。hMSH6高表达组(中度阳性与强阳性表达例数之和)共16例,占53.3%。hMSH6低表达组(阴性与弱阳性表达例数之和)共14例,占46.7%。(3)Pearson卡方检验(Pearson Chi-Square)胶质母细胞瘤病理标本中hMSH6表达高低两组间在性别(p=0.052),年龄(p=0.732),术前KPS评分(p=0.440),手术切除方式(p=0.901),MRI上脑水肿程度(p=0.161)等差别不具有统计学意义(p值均大于0.05)。(4)Cox比例风险回归模型综合单变量和多变量分析,结果提示hMSH6表达情况与术前KPS评分是影响患者术后生存时间的独立变量(p值均小于0.05)。(5)生存分析Kaplan-Meier法和Log-rank检验得到hMSH6在胶质母细胞瘤细胞中表达量越高,患者的术后生存期越短,且这种差别具有统计学意义(Log-rank检验,P=0.0001,χ2=10.685);患者术前KPS评分越高(≥80),患者的术后生存时间越长,且这种差别具有统计学意义(Log-rank检验,P=0.0001,χ2=11.554)。结论:(1)胶质母细胞瘤组织中hMSH6总体阳性表达率达86.7%。(2)胶质母细胞瘤中hMSH6的表达水平、患者术前KPS评分是影响患者预后的独立影响因素。(3)胶质母细胞瘤中hMSH6的表达水平与患者生存时间存在相关关系,表达量越高,患者生存时间越短。hMSH6表达水平可以为胶质母细胞瘤的预后判断提供一种新的可行性方案。(4)患者术前KPS评分与生存时间存在相关关系,KPS得分越高(≥80分),患者生存时间越长。