病毒病和肿瘤病是严重危害人畜健康的重要疾病,而且在肿瘤病中有一部分是由病毒疾病引起的。目前的抗病毒和抗肿瘤药物具有许多副作用,因此,寻找更好疗效和更低毒副作用的治疗病毒病和肿瘤病的药物是医学工作者普遍关心的问题。中药资源丰富,疗效确实和低毒副作用,在治疗病毒病和肿瘤疾病上具有明显的优势。近几十年的研究表明,中医中药防治病毒性传染病的优势在于:(1)具有一定的广谱杀灭或抑制病毒的作用;(2)调动机体防御能力,调节机体的免疫功能;(3)用药安全,无明显毒副作用及无菌群失调、二重感染等弊端。现在有研究证明,中药蟾酥具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、局部麻醉、升压等作用,正是它的抗肿瘤与免疫调节方面等多种作用,决定了在临床应用方面有着重要的地位。蟾酥的化学成分复杂,具体具有免疫活性的成分和化学结构不清楚,给蟾酥中具有免疫活性的成分的研究带来重重困难,不利于在分子水平上来阐明它的作用机制,临床用药不好控制,药效不稳定,重复性低。近年来只是对蟾酥的免疫活性研究进行过一些报道,而且只是检测对免疫系统功能指标的影响,并未从分子水平上来研究其的作用机制。蟾酥注射液具有免疫增强作用,能够刺激体外脾淋巴细胞增殖,提高腹腔巨噬细胞能量代谢水平,提高NK细胞的杀伤能力。另外通过用ELISA方法检测蟾酥注射液对Th细胞分泌细胞因子的影响,发现蟾酥注射液能够明显促进Th1细胞因子(IL-2、IL-12、IFN-γ)和Th2细胞因子IL-4的分泌,同时降低IL-10细胞因子的分泌。此外蟾酥注射液能够提高CD4+ CD8—和CD4+ CD8—单阳性亚群细胞的比例,同时促进脾淋巴细胞进入DNA合成期S期。结果表明,蟾酥注射液具有免疫增强作用。目前研究发现,蟾酥注射液在不同剂量时,对脾细胞和腹腔巨噬细胞增殖作用明显,在协同LPS或者Con A刺激下,作用更加明显。蟾酥注射液够刺激脾淋巴细胞增殖,提示蟾酥注射液具有调节机体细胞免疫和体液免疫功能,但是结果表明对细胞免疫功能的调节作用更明显。这些结论与蟾酥注射液能够增加CD4+、CD8+细胞比例和细胞周期的结果相符。NK细胞是天然免疫系统的重要组成部分,在动物机体抗病毒和抗肿瘤方面发挥着重要作用。所以本试验检测了NK细胞的杀伤能力,结果表明蟾酥注射液具有显著增强NK细胞杀伤靶细胞Yac-1的功能。从以上结论中表明蟾酥注射液不仅能够增强获得性免疫反应,而且能够激活天然免疫反应。由于体内和体外存在一定的差异性,所以应该在体内试验上进一步证实蟾酥注射液具有提高细胞免疫和抗病毒的作用。蟾酥注射液作为中国的传统中药,对各种疾病的治疗作用已经得到国内外的认可。它的抗肿瘤和增强免疫功效的作用是世界公认的。但是全世界对蟾酥注射液的研究从未涉及抗病毒以及病毒引发的肿瘤方向上,这为今后对蟾酥注射液的开发和利用遗留了很多空白。无法让蟾酥注射液这一宝贵的中药资源为人类抗击各种疾病发挥作用。鸡马立克氏病(Marek’s Disease,MD)是由马立克氏病病毒(Marek’s diseasevirus,MDV)引起的一种淋巴细胞增生性传染病,通常以在各种器官和组织引起的单核细胞浸润为特征。目前,马立克氏病仍然是养禽业的重要威胁,疫苗虽然可以预防马立克氏病的发生,但免疫失败时有发生,导致本病的局部爆发。而且,鸡马立克氏病作为研究病毒性肿瘤发生、发展和免疫的重要动物模型,在兽医学、基础医学和比较肿瘤学的研究方面已经作出了重要的贡献。本课题着重研究了蟾酥注射液的体内抑制病毒作用。通过MD动物模型观察蟾酥注射液的体内抑制病毒作用。比较蟾酥注射液组和病毒对照组的发病率、死亡率、平均生存日期、肿瘤阳性率和体重的变化,评价药物的抑制病毒效果。试验结果显示,蟾酥注射液具有良好的抑制MDV的作用,保护率的结果显著高于病毒对照组。在肿瘤检出率上,蟾酥注射液的肿瘤阳性率也显著低于病毒对照组。说明,蟾酥注射液具有显著的抗肿瘤作用,表明蟾酥注射液能够显著促进机体免疫器官的发育,增强其抵抗力。本试验我们从特异性免疫因素、非特异性免疫因素、免疫细胞和免疫分子等方面研究了蟾酥注射液的免疫活性,为进一步研究蟾酥注射液对雏鸡感染马立克氏病病毒和有效的接种马立克氏疫苗,以及作为马立克疫苗的免疫佐剂研究具有指导意义,并为科学的组方和使用蟾酥免疫增强剂,更好的发挥免疫调节作用,提供了科学的试验依据。