金雀根对类风湿性关节炎动物模型抗炎及免疫调节作用的研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:szf_2009
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目的:类风湿关节炎是一种以关节病变为主的慢性全身性免疫性疾病,属于中医“痹证”范畴,它可造成关节各种组织如软骨、韧带、肌腱、骨骼的破坏,导致生活质量下降甚至致残。因其病程迁延,常呈慢性经过,日久可使心、肺、肾、动脉、血管等受累,严重影响人体健康。目前现代医学对类风湿性关节炎的病因及机制尚未完全明了,至今无特效疗法,而中医药治疗本病显示了一定的优势。在名老中医汪履秋临床经验的基础上,汪悦导师提出了肝肾亏虚为病之本,风寒湿邪乃病之标。临床应用培补肝肾,祛风寒湿,活血通络法治疗,有较好疗效。金雀根在治疗中显示出了突出的作用。因此对金雀根药物在实验方面进行研究,探讨金雀根药物在治疗类风湿关节炎中的免疫作用。 方法:实验研究分为3个部分:(1)以昆明大鼠为研究对象,建立佐剂性关节炎模型,设正常组、模型组、金雀根高剂量组、金雀根中剂量组、金雀根低剂量组、雷公藤多甙片组系,进行对佐剂性关节炎大鼠造模足关节体积的影响、对佐剂性关节炎大鼠关节肿胀度的影响、各组佐剂性关节炎大鼠踝关节组织病理改变轻重程度的比较的研究。(2)以昆明小鼠为研究对象,建立Ⅱ型胶原诱导关节炎模型,设正常组、模型组、金雀根高剂量组、金雀根中剂量组、金雀根低剂量组、雷公藤多甙片组系,进行对CIA小鼠足肿胀,关节炎发生率及严重性的评价、对CIA小鼠左足体积的影响、对CIA小鼠关节肿胀度的影响、对CIA小鼠血清抗体的影响的研究。(3)以昆明小鼠为研究对象,建立Ⅱ型胶原诱导关节炎模型,设正常组、模型组、金雀根高剂量组、金雀根中剂量组、金雀根低剂量组、雷公藤多甙片组系,进行对CIA小鼠T淋巴细胞增殖的影响、对CIA小鼠T淋巴细胞粘附能力的影响、对CIA小鼠原代滑膜细胞增殖能力和培养上清液细胞因子影响、对CIA小鼠脾细胞MMP2、TIMP-2表达的影响 结果:(1)对大鼠佐剂性关节炎的影响的实验结果显示:①金雀根高、中剂量组关节炎评分明显低于模型组;②金雀根高、中、低剂量组足跖体积均小于模型组,两者相比差异显著;③大鼠造模后6、10天,金雀根高、中剂量组关节肿胀度小于模型组,两组相比差异显著;④金雀根高、中剂量组的大鼠踝关节组织病理改变明显较轻,与模型组相比差异显著。(2)对小鼠Ⅱ型胶原关节炎的影响及机理实验结果:对小鼠足肿胀,关节炎发生率及严重性的评价实验结果显示:金雀根高、中剂量组可明显减轻关节炎程度和延迟关节炎起始发生,其关节炎评分明显低于模型组。(3)对小鼠Ⅱ型细胞免疫学研究结果:①对小鼠脾T淋巴细胞增殖的影响实验结果显示:金雀根高、中剂量组在1640培养液中及ConA刺激下,脾细胞刺激指数明显低于模型组;②对CIA小鼠脾细胞粘附Ⅱ型胶原的影响实验结果显示:金雀根高、中、低剂量组脾细胞粘附Ⅱ胶原水平均低于模型组,与模型组相比,有显著性差异;③对小鼠致敏脾T淋巴细胞粘附能力的实验显示:金雀根高、中剂量组粘附百分数均低于模型组,与模型组相比,有显著性差异;④对CIA小鼠原代滑膜细胞增殖能力的影响实验结果显示:金雀根高、中剂量组小鼠滑膜细胞增殖小于模型组,与模型组相比,有显著性差异;⑤对小鼠滑膜细胞培养上清液IL-1β、TNF-α含量的影响实验结果显示:金雀根高、中、低剂量组的细胞培养液中IL-1β、TNF-α水平明显低于模型组,有显著差异;⑥对CIA小鼠脾细胞MMP2、TIMP-2表达的影响实验结果显示:降低小鼠脾细胞MMP-2表达,升高小鼠脾细胞TIMP-2表达。 结论:金雀根可明显减轻佐剂性关节炎大鼠足肿胀程度、踝关节组织病理改变,降低关节炎评分。金雀根能抑制CIA小鼠足爪肿胀,减少关节炎发生率;抑制CIA小鼠T淋巴细胞增殖、脾细胞粘附Ⅱ型胶原、致敏脾T细胞粘附能力、滑膜细胞病理性增生、细胞培养液中IL-1β、TNF-α的水平;降低小鼠脾细胞MMP-2表达,升高小鼠脾细胞TIMP-2表达。 金雀根具有良好的抗炎镇痛、调节免疫的作用,对类风湿性关节炎肝肾亏虚患者疗效尤为显著。
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