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葡萄的遗传背景复杂，育种周期长，常规育种方法较难实现品种改良，随着转基因技术的出现与逐步发展，把目的基因转入植株体内，可在不改变多种优良性状的前提下定向改良某些性状，提高育种效率，为葡萄的育种改良提供了一条新途径。葡萄再生频率低是造成葡萄遗传转化困难的关键，使其高效再生是目前葡萄生物技术育种的主要问题。本研究以优良无核葡萄栽培品种莫利莎（Mellisa）、皇家夏天（Summer Royal）试管苗为试材，对影响叶片离体再生不定芽的因素如基因型、基本培养基成分、生长调节剂种类及浓度配比、接种材料类型、接种方式以及培养条件等进行了系统研究，成功建立了莫利莎、皇家夏天离体叶片再生体系。主要研究结果如下：1．基因型是影响葡萄离体叶片再生的重要因素，研究表明：相同再生条件下莫利莎的再生效率显著高于皇家夏天，而且对环境条件以及生长调节剂要求不严格。2．通过对不同培养基的筛选，确定B5为适合莫利莎、皇家夏天离体叶片再生的基本培养基。碳源为10-20g／L的葡萄糖或食用白砂糖。3．不同植物生长调节剂对叶片再生影响很大。研究发现，细胞分裂素BA和TDZ都可以诱导莫利莎、皇家夏天离体叶片再生不定芽，虽然TDZ诱导的不定芽数高于BA，但丛生芽畸形较多，不易成苗，故适于莫利莎、皇家夏天叶片再生的细胞分裂素宜选用BA，浓度分别为4.0mg／L和3.0mg／L；低浓度的生长素就可以诱导两个品种再生不定芽，IBA与BA配合使用不易诱导产生不定芽，且再生率较低，故诱导莫利莎离体叶片再生不定芽的最适生长素为IAA0.10mg／L，皇家夏天为IAA0.05mg／L。4．莫利莎和皇家夏天离体再生以试管苗顶端幼嫩叶片为适宜外植体，叶片不同部位再生结果无显著差异，茎段和叶柄再生效果差；叶片不同接种方式对不定芽再生无显著影响。5．暗培养对叶片再生不定芽是必要的，经过暗培养处理可显著提高叶片再生率，适宜暗培养时间为21d左右。6．试验表明葡萄继代苗对潮霉素（Hyg）的敏感性强于卡那霉素，Hyg3.0mg／L即达到莫利莎继代苗致死浓度，可作为转化后抗性苗的筛选浓度，Hyg0.8mg／L完全抑制莫利莎叶片不定芽的分化，可作为叶盘法转化时抗性芽的选择压；对于皇家夏天，Hyg1.0mg／L达到继代苗致死浓度，可作为转化后抗性苗的筛选浓度，Hyg0.8mg／L完全抑制叶片不定芽的分化，可作为叶盘法转化时抗性芽的选择压。葡萄叶盘法基因转化中抑制农杆菌生长的抗生素可选用头孢霉素（Cef）300mg／L或羧苄青霉素（Carb）400mg／L。