2型糖尿病是一种严重威胁人类健康与生命的疾病，目前的药理研究和治疗方法尚不能涵盖该疾病所涉及的所有代谢性缺陷，因而许多新的药物作用靶点有待开发。胰高血糖素样肽-1(glucagons-like peptide-1，GLP-1)与胰岛素分泌和糖代谢调节密切相关，对胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)结构和信号传导机制的研究，有助于了解其在糖尿病病理进程中的作用，可望为糖尿病的治疗提供新的方向。 对GLP-1R与GLP-1及其类似物Exendin-4．的研究有很多，就GLP-1R的N端片段而言，Exendin-4与它的结合能力要比GLP-1与它的结合能力强，但胰高血糖素样肽-1受体的N端胞外域片段(nGLP-1R)结合Exndin-4的位点是未知的。本实验室已经成功利用大肠杆菌表达系统构建并表达了Exndin-4及SD大鼠的肺组织的胰高血糖素样肽-1受体的N端胞外域片段(nGLP-1R)。为了获得可溶的nGLP-1R，用毕赤酵母分泌表达系统对nGLP-1R进行分泌表达，结果表明，nGLP-1R无法在毕赤酵母中分泌表达。通过使用大肠杆菌表达纯化所得到的nGLP-1R与Exendin-4，用化学交联法对nGLP-1R与Exendin-4的结合活性进行了验证。为了找到nGLP-1R与Exendin-4的潜在的结合位点，构建了nGLP-1R的噬菌体随机突变展示肽库，对不同的突变体的亲和能力进行研究分析。实验结果显示，保守的半胱氨酸C发生变化并未引起nGLP-1R与其配体Exendin-4结合能力的改变。进一步的研究表明，W<39>(在本文中为第十九位氨基酸)对受体结合Exendin-4的能力的影响要低于W<72>(在本文中为第52位氨基酸)，因为缺失了W<39>的突变体依然具有结合Exendin-4的能力，而点突变W<72>R造成了明显的nGLP-1R的结合能力的降低。突变体JP1中有三个点突变：y<22>C，R<101>G和E<108>G，且其结合能力要高于野生型nGLP-1R，这可能是由于极性氨基酸R和E都突变为了非极性氨基酸G，影响到了nGLP-1R的整个肽链的极性，从而其结合能力发生变化。