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本论文主要对棉铃虫核多角体病毒（HearNPV）ORF44（Ha44）的结构和功能进行了初步解析。第一章：文献综述。概括介绍了杆状病毒分类、病毒粒子的形态结构以及病毒的感染机理；并且介绍了杆状病毒的结构蛋白基因的研究进展；同时也对核定位信号的研究进展进行了综述；最后介绍了本论文的目的和意义。第二章：Ha44基因的原核表达及抗体制备。本实验室前期已经将Ha44全长基因克隆至原核表达载体pET-28a，获得pET-28a-Ha44表达质粒。本章中利用pET-28a-Ha44，在大肠杆菌BL21菌株中获得了His-HA44蛋白的高效表达。利用纯化的His-HA44融合蛋白免疫家兔制备了多克隆抗血清，Western blot检测表明所获的血清能与HearNPV感染的昆虫细胞中的天然HA44发生特异性反应。论文第三章开展了Ha44的表达时相分析和缺失实验。Western blot分析表明HA44从病毒感染后18小时开始表达，一直持续到96小时，并且在被感染的昆虫细胞中发生了表达后修饰。利用HearNPV bacmid系统构建了缺失Ha44基因的重组bacmid，利用转座方法构建了回复Ha44基因的重组bacmid。转染和感染实验表明Ha44是HearNPV复制的必需基因。论文第四章利用与EGFP构建融合蛋白的方法，对HA44的蛋白结构域进行了鉴定。将该蛋白N端与EGFP蛋白融合后，瞬时转染细胞，发现HA44蛋白完全定位在细胞核内，并且聚集成点状。对该蛋白进行不同区域的截短，与EGFP融合后进行瞬时转染，结果表明HA44的核定位信号处于N端前130位氨基酸区域、蛋白自聚集区域处于187-255位氨基酸区域。对核定位信号区域的一些可能的关键碱性氨基酸进行点突变，结果表明第25位的精氨酸（R）是影响HA44的核定位信号的关键氨基酸。论文第五章开展了对HA44缺失突变体的拯救实验。利用转座方法构建了回复HA441-130、HA44187-378、HA44187-255、HA44L26和HA44L25L26的重组bacmids。转染与感染实验结果表明HA441-130，HA44187-378和HA44187-255不能拯救HA44的缺失，而影响核定位信号的点突变HA44L25L26能够拯救HA44的缺失。生长曲线结果表明HA44L25L26突变体虽然可以拯救HA44的缺失，但还是在一定程度上影响了病毒的复制效率。