几丁质是自然界中储存量仅次于纤维素的第二大天然多糖，广泛存在于真菌、昆虫和甲壳类动物之中。几丁质是昆虫表皮(外骨骼)的主要成分，也是许多昆虫肠道表皮的重要成分，而几丁质合成酶(CHS)是几丁质生物合成过程中非常重要的酶。但是在相当长一段时间，关于CHS的研究工作主要集中在真菌领域，直到2000年，才有第一个昆虫的CHS被克隆出来。迄今为止，昆虫几丁质合成酶的研究仍不多见，但是随着研究的深入，人们更加确认CHS对于昆虫生长发育的重要性是不容忽视的。 本文在已经克隆得到甜菜夜蛾几丁质合成酶(SeCHS)cDNA的基础上，进一步得到了其基因组DNA全长，约1.5kb，包含21个外显子和20个内含子。通过分析发现其存在交替外显子结构，证明此cDNA序列为A类的几丁质合成酶基因(SeCHSA)。Northern blot分析表明，SeCttSA在甜菜夜蛾幼虫的表皮组织、气管有大量表达，说明SeCHSA对于表皮和气管几丁质的合成发挥了重要作用。但是在脂肪体，马氏管中则检测不到其表达。分析还表明尽管SeCHSA基因在甜菜夜蛾生长发育的过程中都有表达，但是在各龄开始和结束时以及蛹期表达量要明显高于其他时期，而此时正是甜菜夜蛾新表皮形成的重要时期，SeCHSA对表皮形成的重要性再次得到验证，并且暗示此基因的表达可能受到某些因子的调控。利用免疫组化(Immunocytochemistry)技术，我们研究了此基因的蛋白定位，发现SeCHSA蛋白在表皮组织和气管壁中有大量堆积，再次证明此基因参与了表皮和气管几丁质的形成。 为进一步研究此基因的功能及其对昆虫生长发育的影响，我们采用了RNAi技术。通过细胞中的RNAi试验，我们筛选出了针对SeCHSA的有效的dsRNA和siRNA片段，发现这两种RNA均可以在细胞中引起目的基因的沉默。之后我们用体外注射的方法在甜菜夜蛾5龄幼虫体内实现了目的基因的干扰。并且发现，注射siRNA比注射dsRNA可以更多地引发干扰现象。当SeCHSA基因的表达受到抑制之后，昆虫的正常生长发育即被破坏，产生发育畸形死亡的现象，注射siRNA组的畸形率高达50﹪，这与注射buffer的对照组(11.6﹪)和不注射(0﹪)的对照组相比，有显著差异。表皮电镜切片显示，与正常表皮组织相比，注射siRNA组的表皮的几丁质不再呈现规则的片层结构，而是变得杂乱无章；气管组织的几丁质染色显示，注射siRNA组的气管在伸长过程中出现畸形，且几丁质含量有所降低。这些结果说明，SeCHSA对甜菜夜蛾的生长发育有着至关重要的作用，基因的不表达可直接导致甜菜夜蛾的发育畸形甚至死亡。