电针刺激“足三里”、“曲池”穴对自发性高血压大鼠血压和肾功能影响的机制研究

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目的:本实验通过观察电针刺激足三里穴、曲池穴对自发性高血压大鼠(SHR)鼠尾动脉收缩压及血浆中一氧化氮(NO)、前列环素(PGI2)、血管紧张素Ⅱ(AngII)含量的影响,评价针刺调节血管舒缩因子释放对血压的影响;同时研究其对SHR血清中血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),和24小时尿液中尿微量白蛋白(mALB)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)含量的影响,评价针刺足三里穴、曲池穴对SHR肾功能的影响;采用HE染色及免疫组化法观察肾脏组织的形态结构和肾脏Ⅰ型、Ⅳ型胶原含量变化,评价针刺对SHR大鼠肾脏形态结构的影响;并进一步研究针刺对肾脏激肽释放酶mRNA及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨针刺足三里穴、曲池穴降压和肾功能保护的作用机制。材料与方法:采用随机数字表法将24只24周龄自发性高血压大鼠(SHR)每组8只分为三组:SHR组(每日捆绑固定20min,不予针刺);培哚普利组(培哚普利悬液(0.4mg/kg/d)每天灌胃一次);针刺组(捆绑大鼠后取双侧“曲池”“足三里”穴,毫针刺入5-7mm,接电针仪,疏密波刺激20min,强度以针柄微颤为度,1次/天)。以同龄同种系正常血压的京都种大鼠(WKY)8只为WKY组(每日捆绑固定20min,不予针刺)。采用智能无创血压计测量大鼠初次干预前以及治疗后4h、2周、4周、6周大鼠尾动脉收缩压变化情况,每次测量时间为实验干预后4h。连续治疗6周。治疗结束后,收集大鼠24小时尿液,用ELISA法测尿中尿微量白蛋白(mALB)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)含量的影响;腹主动脉抽血,部分血离心分离血清,运用全自动生化分析仪检测血清肌酐、尿素氮的含量;部分血滴加抗凝剂,离心收集血浆,用ELISA法检测血浆一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量;取肾脏组织50mg进行HE染色病理形态学观察及免疫组化方法检测肾脏Ⅰ、Ⅳ型胶原的表达;另取肾组织约50mg用RT-PCR方法检测肾脏激肽释放酶mRNA、TGF-β1mRNA的表达。数据采用SPSS16.0软件进行单因素方差分析,组间两两比较采用LSD法分析,结果以均数±标准差(x±s)表示,P<0.05被认为有显著性差异。结果:1.针刺足三里、曲池穴对SHR尾动脉收缩压具有较好的降压效果,与培哚普利治疗组降压效果相似,而针刺的即时降压效果优西药组。2.针刺足三里、曲池穴提高SHR血浆中血管内皮舒张活性物质NO、PGI2含量,降低缩血管活性物质AngⅡ的含量,调节了血管内皮舒缩平衡功能。3.针刺足三里、曲池穴明显降低SHR血清中尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)的含量及尿液中尿β2-微球蛋白(β2-MG)、微量白蛋白(MALb)的含量,肾功能明显改善。4.针刺足三里、曲池穴改善SHR肾脏组织病理形态结构,降低血管Ⅰ、Ⅳ型胶原的表达,减轻了肾小球硬化和肾间质纤维化。5.针刺足三里、曲池穴通过提高SHR激肽释放酶mRNA的表达水平,降低TGF-β1mRNA的表达水平,发挥肾脏保护作用。结论:1.针刺足三里、曲池穴对SHR具有降压作用。2.针刺足三里、曲池穴对高血压肾损害SHR的肾脏具有保护作用。3.针刺足三里、曲池穴通过肾素-血管紧张素系统(RAS)和激肽释放酶-激肽系统(KKS)调节血管内皮舒缩因子NO、PGI2、AngⅡ、激肽等释放平衡以及降低TGF-β1表达发挥对SHR降压和肾保护作用。
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