ApoA-I对LPS诱导的内毒素血症小鼠的治疗作用的研究

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背景:内毒素又称脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),是革兰阴性细菌外膜的主要成分。内毒素血症及与其有关的急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征和多器官功能障碍综合征是病人感染死亡的重要原因。载脂蛋白AI(Apolipoprotein AI,ApoA-I)是高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)的主要载脂蛋白,能够直接或间接结合LPS,中和LPS的毒性。目的:本项目拟通过建立内毒素血症小鼠模型,探讨ApoA-I对LPS诱导的内毒素血症的治疗作用及可能机制。方法:以小鼠内毒素血症模型为研究对象,小鼠被随机分为生理盐水组、ApoA-I低剂量组(10mg/kg)、ApoA-I高剂量组(50mg/kg)、LPS组(LPS+D-半乳糖)、D-半乳糖组(生理盐水+D-半乳糖)。建立小鼠内毒素血症模型;以放射免疫分析药盒测定血浆中细胞因子TNF-α、IL-6和IL-8的浓度;取小鼠肝组织和肺组织做病理切片,观察组织病理变化;RT-PCR法检测小鼠不同组织中LPS受体CD14的mRNA的表达;Western blotting(WB)法检测小鼠不同组织中LPS受体CD14的蛋白表达。实验结果:与LPS组相比,ApoA-I能够降低血浆TNF-α(P<0.05)、IL-6(P<0.01)和IL-8(P<0.01)的水平。且ApoA-I的高剂量组较低剂量组TNF-α(P<0.05),IL-6(P<0.01)和IL-8(P<0.01)下降更明显。组织病理分析表明,ApoA-I可以显著减轻内毒素血症小鼠肺组织和肝组织的损伤程度。RT-PCR结果显示:ApoA-I治疗后,LPS诱导的CD14 mRNA的表达增量显著降低(P<0.01),且ApoA-I的高剂量组小鼠心、肺、肝、肾组织中的CD14mRNA的表达降低较低剂量组更明显(P<0.05)。WB结果显示:ApoA-I治疗后,LPS诱导的CD14蛋白的表达显著降低(P<0.01),且ApoA-I的高、低剂量组小鼠心、肺、肝、肾组织中的CD14蛋白的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:1)ApoA-I能降低LPS诱导的小鼠血浆中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的浓度;2)ApoA-I能减轻LPS诱导的小鼠肺和肝脏的损伤程度;3)ApoA-I能降低LPS诱导的小鼠CD14在心、肺、肝、肾脏组织中的表达。
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