珙桐为第三纪古热带植物区系的孑遗种,为国家一级保护珍稀濒危植物,也是世界著名的观赏木本花卉。到目前为止,关于珙桐宏观研究的报道已有许多,但是关于珙桐分子方面的基础研究相对缺乏。为了探讨珙桐含有的特有种属基因,保存珙桐的资源信息库,本论文实验构建了珙桐叶片组织全长cDNA文库,并对文库的质量进行了初步鉴定。　　 本论文实验以珙桐叶片为研究材料,采用Trizol法和Rneasy Plant Mini Kit法提取珙桐叶片组织总RNA,检测结果表明用Rneasy Plant Mini Kit法提取的效果较好。基于此结果本实验用Rneasy Plant Mini Kit法提取珙桐叶片总RNA为SMARTTM cDNA Library Construction Kit的起始材料合成全长cDNA并连接到λTriplEx2载体上,Gigapack(R)Ⅲ Gold Packaging包装重组λDNA。包装好的噬菌体颗粒侵染E.coli XL1-Blue、BM25.8大肠杆菌,成功构建了珙桐叶片组织的cDNA文库。　　 珙桐叶片总RNA反转录成单链cDNA,长距离PCR方法合成双链cDNA；PCR产物经蛋白酶K消化后,用SfiI酶切；将酶切产物进行分级分离,回收0.5kb以上的cDNA组分,并与入TriplEx2载体连接；连接产物经体外蛋白包装,产生原始文库；鉴定文库的滴度和重组效率后,进行文库扩增和保存。随机挑取40个噬菌斑,用载体克隆位点两端的通用引物进行PCR扩增,以检测所构建的cDNA文库的质量。经测定该文库初始滴度为6.3×106 pfu/ml,重组率为97.4％；扩增后滴度为5.16×107pfu/ml；插入片段长度为0.4～2.0kb。由于反转录过程中采用附加序列的方法使全长mRNA得到反转录,所以得到的cDNA是完整的,完全符合cDNA文库的要求。通过对cDNA文库的质量检测,文库中插入片段长度的长度、文库的滴度以及重组率都符合cDNA文库的要求。　　 珙桐叶片λ噬菌体cDNA文库的成功构建,为进一步开展珙桐EST文库构建及目的基因克隆功能基因组研究奠定了物质基础。