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目的：原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）是种以肝内小胆管进行性、非化脓性炎症为特征的自身免疫性疾病。如何有效治疗PBC，改善患者的预后及生存质量是目前研究的热点。国外临床实践发现PPAR泛激动剂苯扎贝特（Bezafibrate,BF）对PBC患者有一定疗效，但其作用机制不明。我们前期研究发现PBC患者外周血中Th17细胞的表达水平明显高于健康对照组，提示苯扎贝特的疗效有可能通过干预Th17细胞分化而发挥作用。本研究拟从PBC患者临床样本分析来探讨苯扎贝特靶向Th17细胞治疗PBC，为进一步揭示PBC发病机理，寻找更具免疫调节功能的干预措施提供实验室依据。 方法： 1.苯扎贝特影响Th17细胞分化最佳浓度的筛选 采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离正常人外周血单个核细胞（PBMC）；免疫磁珠分选技术（MACS）分选CD4+T细胞。CD4+T细胞以1×109/L的密度分4组进行培养，加入不同浓度的苯扎贝特诱导刺激： (1)medium组； (2)10μM BF组； (3)50μM BF组； (4)100μM BF组； 流式细胞术检测苯扎贝特抑制Th17细胞分化的最佳浓度。 2.苯扎贝特体外干预PBC患者外周血Th17细胞分化 (1)Ficoll-Hypaque密度梯度离心法及MACS从PBC患者和正常人外周血中分选CD4+T细胞，不同浓度的苯扎贝特诱导刺激培养： ① medium组 ②50μM BF组 流式细胞术检测苯扎贝特对Th17细胞分化的影响。 (2)RT-PCR检测PBC患者和正常人外周血中CD4+T细胞培养9天后IL-17和IFN-γmRNA的表达。 (3)ELISA检测PBC患者和正常人外周血中CD4+T细胞培养9天后上清液中IL-17和IFN-γ表达水平。 结果： 1.苯扎贝特在一定范围内呈剂量依赖性抑制正常人外周血Th17细胞分化，其中50μM处理后，IL-17表达阳性细胞率最低（0.1%～0.5%），平均0.3%左右，是抑制Th17细胞分化的最佳浓度。 2.苯扎贝特处理PBC患者和正常人外周血CD4+T细胞中IL-17+IFN-γ-,IL-17+IFN-γ+表达水平较未处理组均显著降低（P＜0.05)；只表达IFN-γ的CD4+T细胞较未处理组均无明显差异（P＞0.05）。 3.苯扎贝特处理PBC患者和正常人外周血CD4+T细胞后，IL-17mRNA表达水平均明显低于未处理组（P＜0.05)；而IFN-γmRNA表达水平较未处理组均无明显差异（P＞0.05）。 4.苯扎贝特处理PBC患者和正常人外周血CD4+T细胞培养上清液中IL-17水平较未处理组均显著降低（P＜0.05)，而IFN-γ水平较未处理组均无明显差异（P＞0.05）。 结论：初步筛选出50μM苯扎贝特是抑制Th17细胞分化的最佳浓度；在Th17细胞极化条件下，苯扎贝特明显抑制PBC患者外周血中CD4+T细胞中IL-17表达，而不影响IFN-γ表达。