目的:研究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（Nicotinamide adenine dinucleot-ide,NAD⁺）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）小鼠脑组织中沉默信息调节因子3（Silent information regulator of transcription 3,SIRT3）表达的影响,探究NAD⁺对EAE小鼠发挥治疗作用可能的通路及机制,为临床多发性硬化的治疗寻找新的思路。方法:1.选用C57BL/6雌性小鼠（周龄8-10周、体重18-20g）,以MOG_35-55作为免疫抗原,辅以完全弗氏佐剂、结核菌素充分乳化,使结核杆菌H37Ra的终浓度为4mg/ml,于小鼠背部脊柱两旁皮下注射,并分别于免疫的当天（免疫当天为第0天）及第2天,分两次腹腔注射0.5ml百日咳毒素（PTX）,构建EAE小鼠模型。2.将实验小鼠随机分为正常对照组（Control组）、EAE模型组、NAD⁺治疗组,每组8只。免疫后的第1天起,NAD⁺组小鼠每天腹腔注射NAD⁺250mg/kg,Control组及EAE组小鼠每日腹腔注射等量的磷酸盐缓冲生理盐水（PBS）,每日早晚2次采用对小鼠进行神经功能评分（采用Weaver’s 15分法）并同时记录体重。3.于小鼠发病高峰期（免疫后第25天）,从Control组、EAE组、NAD⁺组各取4只小鼠,进行灌注取材,留取脊髓腰膨大和脑组织分别进行HE、LFB染色,观察炎症细胞浸润及脱髓鞘程度。进行SIRT3免疫组织化学染色,观察SIRT3的表达情况。每组中另外4只小鼠,行新鲜取材,留取脑组织,利用Western blot技术检测SIRT3、AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR的表达情况。4.实验数据采用SPSS 21.0软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差（Mean±SD）表示。计量资料均数的组间比较满足正态性时,采用完全随机设计的方差分析,方差齐时应用SNK-q检验,方差不齐时应用Dunnett’s T3检验,非正态时应用Kruskal-Wallis H检验;发病率以百分比表示,用卡方检验进行统计学分析。临床神经功能评分用Mann-Whitney U检验进行统计学分析。P<0.05具有统计学意义。结果:1.NAD⁺干预可以降低EAE小鼠发病率,减轻EAE小鼠神经功能损害症状。2.与空白对照组和EAE组相比,NAD⁺干预可以减轻中枢神经系统炎性细胞浸润及脱髓鞘,并增加脑组织中SIRT3的表达。3.NAD⁺干预可以增加EAE小鼠脑组织中SIRT3、p-AMPK蛋白的表达,降低p-mTOR蛋白的表达。而对AMPK、mTOR蛋白的表达水平无明显影响。结论:1.NAD⁺干预对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠起到了保护作用并增加机体内SIRT3的表达。2.NAD⁺可能是通过激活SIRT3/AMPK/mTOR通路来发挥对EAE的保护作用。