黄芪地上部分化学成分及代谢组学研究

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目的:对黄芪地上部分有效部位提取纯化工艺进行考察;对黄芪地上部分与地下部分的药材进行比较;基于1H NMR代谢组学的方法,对黄芪地上部分进行研究,为黄芪地上部分的开发利用提供参考。方法:以黄芪地上部分总皂苷含量为指标,优选黄芪地上部分总皂苷提取工艺,比较不同树脂对黄芪地上部分皂苷的分离纯化效果,并考察大孔吸附树脂对黄芪地上部分总皂苷最佳纯化条件;通过化学成分分析和药效学研究相结合的方法,对黄芪地上、地下部分进行全面、系统比较,即采用多指标定量方法对黄芪地上、地下部分10种化学成分进行定性、定量分析;以小鼠血细胞计数为指标,对比观察黄芪地上、地下部分水煎液对环磷酰胺所致小鼠骨髓造血功能损伤的保护作用;基于1H NMR代谢组学的方法,对黄芪地上、地下化学成分进行分析,考察黄芪地上部分对小鼠血清代谢物的影响。结果:考察黄芪地上部分总皂苷提取纯化工艺,确定了提取条件为:40倍量80%乙醇溶液,超声提取30 min,提取一次。采用D101大孔吸附树脂纯化条件为:上样浓度0.1g·mL-1,上样流速为2 BV/h,首先采用8 BV蒸馏水洗脱,后用40%乙醇溶液5 BV洗脱,最后用5 BV 70%乙醇溶液洗脱。收集70%乙醇洗脱液,减压回收乙醇,干燥,即得。黄芪地上、地下部分化学成分相似,其中黄芪皂苷IV、黄芪皂苷III、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷地上部分含量均高于地下部分。药效学研究结果表明,黄芪地上、地下部分均能升高受损小鼠白细胞、红细胞、血红蛋白数量,药效没有明显差异,用药期间各组小鼠未出现明显的副作用。黄芪地上部分、地下部分中黄酮类、皂苷类以及初级代谢产物成分类似,黄芪地上部分对小鼠体内引起的内源性代谢物变化结果表明,在相同剂量下,除个别氨基酸外,黄芪地上部分与地下部分引起小鼠体内代谢变化趋势基本一致,表明黄芪地上部分与地下部分在某些药理方面可能具有一致性。结论:确定黄芪地上部分总皂苷的提取纯化工艺,使其含量达到50%以上。黄芪地上、地下部分化学成分相似,在升高受损小鼠白细胞、红细胞、血红蛋白数量的药效方面没有明显差异。黄芪地上部分与地下部分初级代谢产物类似,在小鼠体内代谢变化趋势基本一致。黄芪地上部分具有一定的利用价值,对黄芪地上部分的探索研究,可以变废为宝,使资源得到充分应用,对中药资源的可持续利用具有重要意义。
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