【摘 要】
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玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63是刘大群教授在马铃薯疮痂病自然衰退土壤中分离得到的菌株。通过室内试验表明,该菌株对多种植物病原真菌和细菌有较强的抑制作用;温室和大田试验表
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玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63是刘大群教授在马铃薯疮痂病自然衰退土壤中分离得到的菌株。通过室内试验表明,该菌株对多种植物病原真菌和细菌有较强的抑制作用;温室和大田试验表明该菌株的代谢产物对棉花黄萎病和瓜类白粉病有较好的防效。其有效成分和作用机理正在研究中。抗生素阻断突变体是推断抗生素合成途径的基础理论研究的好材料。本研究以玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63为出发菌株,以棉花黄萎病菌为指示菌,通过紫外线、氯化锂(LiCl)、微波、硫酸二乙酯(DES)等诱变剂对其进行了处理。最终从微波处理10s、35s和40s的菌株中共筛选到6株对棉花黄萎病菌丧失拮抗活性的突变体,分别命名为MV11,MV18,MV21,MV22,MV35和MV40;从DES处理90min的菌株中筛选到2株生物合成阻断突变体,命名为DE01和DE02。8株突变体连续传代十代后,性状保持稳定,对指示菌无拮抗活性。对突变体的生物学特性进行了研究。通过插片培养结合光学显微镜观察发现突变体孢子丝螺旋形,孢子椭圆形,在形态上没有显著变化,但是突变体表现出在基内菌丝及气生菌丝颜色上的变化。基内菌丝颜色比出发菌株浅,气生菌丝颜色有7株变为灰绿色,孢子产生丰富;1株变为黑色,孢子产生减少。突变体的抗菌谱发生变化,对所用8种供试病原菌均无抑菌作用。突变体与出发菌株16S rDNA存在较大差异,而且各突变体的突变热点相似。将突变体菌丝体用丙酮萃取抽提,产物进行HPLC分析,发现与出发菌株不同,突变体中抗生素的特征峰消失,而在保留时间6min左右出现了新的吸收峰。将突变体中的任意两株菌两两配对,进行共合成试验,结果表明,菌株DE02和MV40可以共同合成抗生素,其余6株突变体没有表现此特性。抑菌圈出现在菌株DE02一侧,说明菌株DE02为转化株,MV40为分泌株,它的阻断位点在整个次级代谢途径中处于DE02突变位点之后,这两株突变体的阻断可能是参与抗生素合成代谢途径中酶的结构基因某位点受突变而引起。而其它菌株不能作为转化株或分泌株共合成抗生素。
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