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目的:本实验选用中药鸦胆子油乳注射液进行药物实验,研究其对人脑SKMG-4胶质瘤细胞的增殖抑制作用及其作用机制,为中药在对脑胶质瘤的化疗应用上提供理论依据。方法:体外培养人脑SKMG-4胶质瘤细胞,分为实验组和对照组,根据预实验结果将实验组中鸦胆子油乳注射液的浓度分为5g/L、2.5g/L、1.25g/L、0.625g/L,对照组除不加鸦胆子油乳注射液外其余条件与实验组完全一致。将实验组和对照组放于5%CO2,37℃培养箱中作用48h。1、在倒置显微镜观察不同浓度的鸦胆子油乳注射液对SKMG-4胶质瘤细胞生长抑制情况;2、利用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测鸦胆子油乳注射液对SKMG-4胶质瘤细胞增殖抑制影响;3、利用流式细胞术(FCM)分析鸦胆子油乳注射液处理前后SKMG-4胶质瘤细胞的周期变化;4、应用免疫组化法检测鸦胆子油乳注射液作用前后实验组和对照组SKMG-4胶质瘤细胞中凋亡抑制基因Bcl-2和基质金属蛋白MMP-2的表达情况;5、应用实时荧光定量RT-PCR检测实验组和对照组SKMG-4胶质瘤细胞内凋亡抑制基因Bcl-2的表达情况。本文所采用SPSS13.0软件分析包,所有结果均以均数±标准差表示,采用方差分析对结果进行分析,检验标准采用P<0.05有统计学意义。结果:1、倒置显微镜观察发现随着鸦胆子油乳注射液浓度增加,SKMG-4胶质瘤细胞生长密度下降、细胞体积缩小、细胞间距增大、细胞核碎裂、皱缩的圆形细胞(即凋亡细胞)增多。2、MTT结果显示随着鸦胆子油乳注射液浓度的增加,对SKMG-4胶质瘤细胞的增殖抑制作用逐渐增强,且呈剂量依赖性,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。3、流式细胞仪分析显示随着鸦胆子油乳注射液浓度的增加G1期逐渐增加,S期逐渐减少,与对照组相比较,浓度为5g/L、2.5 g/L、1.25 g/L时差异有统计学意义(P<0.05)。当药物浓度为0.625 g/L时差异无统计学意义(P>0.05)。4、免疫组化显示随着鸦胆子油乳注射液浓度的增加,Bcl-2和MMP-2在SKMG-4胶质瘤细胞胞浆的表达逐渐减少。(胞浆内棕黄色颗粒为阳性表达)。5、实时荧光定量RT-PCR结果显示随着鸦胆子油乳注射液的浓度增加凋亡抑制基因Bcl-2mRNA的表达逐渐减少。与对照组比较具有显著统计学意义(P<0.01)。结论:1、鸦胆子油乳注射液在体外可以显著抑制SKMG-4胶质瘤细胞的增殖,并且可降低SKMG-4胶质瘤细胞的侵袭性,而且这种抑制作用存在剂量依赖性。2、鸦胆子油乳注射液可以使SKMG-4胶质瘤细胞产生明显的形态学和生化特征的改变,从而促使SKMG-4胶质瘤细胞产生凋亡。3、鸦胆子油乳注射液抑制SKMG-4胶质瘤细胞的增殖可能是通过阻滞SKMG-4胶质瘤细胞周期的G1期向S期进展和抑制凋亡抑制基因Bcl-2表达来实现的。4、鸦胆子油乳注射液降低SKMG-4胶质瘤细胞的侵袭性可能与抑制基质金属蛋白MMP-2基因的表达有关。