【摘 要】
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血红素加氧酶(Heme oxygenase)在哺乳动物的细胞生存和稳定有着广泛的生物学作用。最近研究表明HO参与调节植物抵抗盐害、诱导气孔关闭、缓解重金属胁迫和促进不定根发生等过
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血红素加氧酶(Heme oxygenase)在哺乳动物的细胞生存和稳定有着广泛的生物学作用。最近研究表明HO参与调节植物抵抗盐害、诱导气孔关闭、缓解重金属胁迫和促进不定根发生等过程。为了探查HO在盐诱导的侧根发生中的作用,本文研究了内源HO的变化以及对侧根发生的影响和相关的信号通路。结果发现NaCl对侧根的诱导呈浓度依赖方式,并促进番茄幼苗根部HO的转录水平、蛋白表达及活性。为了进一步验证HO是否参与了盐诱导的侧根发生过程,本文采用了HO-1专一性抑制剂ZnPP和活性诱导剂Hemin对番茄幼苗侧根发生进行了分析,发现ZnPP能够逆转5 mM NaCl对侧根发生及HO表达的诱导作用;而Hemin能恢复25 mM NaCl对侧根发生及HO活性的抑制作用。进一步的研究还发现,NaCl通过上调细胞周期基因LeCYCD3;1、LeCDKAl、LeCYCA2;1和LeCYCA3;1,以及下调LeKRP2的转录来促进侧根的发生,而ZnPP则能起逆转作用。上述结果表明HO参与了盐诱导的侧根发生,并与其对细胞周期基因的表达有关。此外,本文还研究了H202在盐诱导的番茄侧根发生中的作用。荧光检测发现盐诱导的番茄幼苗根部的H202能被其清除剂CAT和DMTU清除,进而逆转盐对侧根发生的诱导作用;CAT和DMTU还能够显著逆转盐对HO基因转录、蛋白表达及活性的诱导;用外源的H202模拟内源H202水平的结果发现,其以浓度依赖效应显著促进根部H202荧光的产生和侧根发生;H202对HO基因转录、蛋白表达及活性的诱导具浓度依赖效应,并通过上调LeCYCD3;1和LeCDKA1的转录并抑制KRP2的转录来促进侧根发生,而ZnPP则能阻断上述效应,从而暗示在盐诱导的侧根发生中H202是HO的上游信号分子。综合以上的实验结果,我们提出在番茄侧根发育进程中可能存在着一条信号转导通路,即NaCl→H2O2→HO→侧根发生。
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