MiR-145通过Nanog抑制胃癌干细胞形成的研究

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目的:探讨miR-145对不同生长方式胃癌干细胞形成的影响,为胃癌的早期诊断和判断预后提供新方向。方法:通过收集2012年3月至2013年9月厦门大学附属中山医院胃肠外科胃癌手术切除标本共95例,每例均包括胃癌组织及相对应的胃正常上皮组织。以miR-145作为研究对象,采用RT-PCR方法检测胃癌组织及相对应胃正常上皮组织中miR-145的表达情况。应用生物信息学软件预测miR-145的靶基因,选择干细胞相关因子Nanog作为研究对象。采用荧光素酶报告基因技术检测miR-145与Nanog靶向关系。RT-PCR方法检测Nanog mRNA在不同生长方式胃癌中的表达水平,并通过慢病毒转染在胃癌细胞MGC-803中过表达miR-145,采用无血清培养形成肿瘤球(spheroid)方法检测其对胃癌干细胞形成的影响。结果:(1)胃癌组织中miR-145的表达水平明显低于相应胃正常上皮组织,在浸润型胃癌中的表达水平明显低于膨胀型胃癌,miR-145在年龄较大(≥60岁)、瘤体较大(≥7cm)、淋巴结转移较多(N2+N3)、临床分期较晚(Ⅲ期+Ⅳ期)、Borrmann氏分型的I型和Ⅱ型胃癌和Ming氏分型中的膨胀型胃癌中的表达水平分别显著高于年龄较小(<60岁)、瘤体较小(<7cm)、淋巴结转移较少(N0+N1)、临床分期较早(I期和Ⅱ期)、Borrmann氏分型的Ⅲ型+Ⅳ型胃癌和Ming氏分型中的浸润型。(2)Nanog mRNA在浸润型胃癌组织中的表达水平高于膨胀型胃癌组织。(3)miR-145和Nanog在胃癌组织中的表达呈负相关。(4)过表达miR-145能有效抑制胃癌细胞瘤球形成,而当上调Nanog的表达时,肿瘤细胞的增殖能力可以部分被逆转,胃癌细胞单克隆成瘤能力就随之增加。结论;两型胃癌中miR-145表达均下调,在浸润型胃癌下调更明显。相反地,Nanog在两型胃癌中表达均升高,在浸润型胃癌中升高更明显,两者负相关。MiR-145通过Nanog抑制两型胃癌干细胞的形成,两者有望成为诊断和判断胃癌预后的指标。
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