葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,E.C.1.1.3.4,简称GOD)能够在有氧条件下催化葡萄糖产生葡萄糖酸和过氧化氢,具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等作用,广泛应用于食品、饲料、医药等行业。葡萄糖氧化酶分布于动物、植物和微生物体内,但由于微生物具有生长繁殖速度快,来源广等特点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源。目前,工业生产上主要利用黑曲霉或青霉发酵生产葡萄糖氧化酶。本研究从土壤中分离纯化得到一株葡萄糖氧化酶产生菌,经BIOLOG微生物鉴定系统鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger),研究了培养基组成和理化因子对产生葡萄糖氧化酶酶活力的影响,确定了最佳发酵条件。通过研究得到如下结论:(1)培养基中主要营养物最佳成分分别为葡萄糖、蛋白胨、硝酸钠。(2)培养基中各营养物最佳浓度分别为葡萄糖100g/l,蛋白胨4 g/l,硝酸钠3 g/l,磷酸氢二钾2g/l,硫酸镁0.7 g/l,碳酸钙3.5 g/l,氯化钾0.5 g/l。使用优化后的培养基产酶活性为1.17μmol/min,较未优化前(0.79μmol/min)有明显提高。(3)黑曲霉菌摇床发酵产葡萄糖氧化酶的最佳时间为72h、培养基pH为6、培养温度为28℃、振荡器转速为200转/分、接种量为10%、菌龄为36h。(4)黑曲霉发酵罐发酵试验的最佳条件为温度28℃、搅拌器转速为200转/分、pH为6、发酵时间48h。(5)麸皮固态发酵发酵黑曲霉产葡萄糖氧化酶的最适条件为:温度30℃、周期72h、液料比为1.5。