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目的:癌胚抗原(CEA)与腹腔肿瘤的发生、发展有着密切关系,肿瘤细胞表达CEA mRNA的水平显著高于非肿瘤。CEA mRNA有望成为特异性、敏感性、实用性较高的腹腔肿瘤标志物。端粒酶发现于二十世纪八十年代,随后并在人Hela细胞中检测到端粒活性,从此,人们对端粒、端粒酶(TA)的研究进一步深入开展。目前,端粒、端粒酶与细胞衰老及肿瘤关系的研究已经成为分子生物学、细胞生物学等多个相关学科共同关注的热点之一。本研究通过检测腹腔化疗前后腹液中肿瘤相关性靶基因标志物CEA mRNA和TA(端粒酶),并检测化疗前后血细胞中T细胞亚群的变化,以期了解肿瘤标志物的变化与机体免疫系统的相关关系,通过综合分析,希望这些指标在预测肿瘤微转移、判断预后与腹腔灌注化疗疗效中更具有应用价值,为肿瘤临床诊断腹膜微转移、了解腹腔灌注化疗疗效、判断预后等提供依据。
方法:研究对象为我院确诊的肿瘤患者68例、非肿瘤患者33例,分别为观察组及对照组,两组年龄在30~85岁之间。观察组为腹腔转移患者,包括胃癌、大肠癌、肝癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫癌;对照组为非肿瘤患者,包括肝硬化腹水、肾病性腹水、结核性腹水。观察组于给药前采集腹水或腹腔冲洗液(而者统称为腹液)、及外周血,再于化疗疗程结束后再取腹液及外周血一次,对照组只取腹液及外周血一次,将取出腹液立即送实验室,利用PCR、逆转录等方法分别进行CEAmRNA、TA、及常规细胞学及CEA(癌胚抗原)检测,并通过流式细胞学检测外周血中T细胞亚群,明确上述指标在腹腔转移的发展变化及腹腔灌注化疗疗效、判断预后方面的应用价值。
结果:
1.化疗前各指标检测,肿瘤组,CEAmRNA和TA的阳性结果与细胞学阳性结果比较,差异具有显著性意义(x2=6.67和8.05,P值均<0.01);68例肿瘤患者免疫功能降低,且CEAmRNA阳性患者与CEAmRNA阴性患者比较有统计学差异(P值<0.01)。非肿瘤组,1例TA阳性结果来自非癌性肝病,其他阳性结果均来自结核性疾病,且三种疾病中有20例免疫功能降低患者出现。
2.化疗后各指标的总体阳性结果均显著性低于化疗前(x2=9.96、15.62、8.62、12.97,P值均<0.01),其中,化疗有效者(x2=19.30、38.25、15.82、36.68,P值均<0.01)和化疗无效者(P值均<0.01),而化疗无效者与化疗前的结果无显著性(x2=0.52、0.03、0.25、1.21,P值均>0.05),且化疗后患者细胞免疫功能提高(P<0.05)。
3.腹腔转移患者的生存情况,化疗有效组CEAmRNA和TA阳性、免疫功能降低者13例(其中,CEAmRNA+TA+免疫功能降低三项阳性者6例,均与12个月内死亡),无效组指标阳性者29例(其中,CEAmRNA+TA+免疫功能降低三项阳性者27例,均与12个月内死亡)。随访至24个月,68例腹腔转移癌患者仅化疗有效组有2例生存;其中,CEAmRNA或TA指标阳性者或免疫功能明显降低者多于12个月内死亡,仅1例生存至18个月。化疗有效组的生存例数多于无效组,尤其是6~12月生存例数的差别具有显著性。
结论:本项研究表明,腹液中CEAmRNA和TA检测并结合患者淋巴细胞表型,对了解肿瘤患者的免疫功能、肿瘤的腹腔转移及腹腔灌注化疗疗效、判断预后具有较大的帮助。