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本文采用SD大鼠四动脉结扎法建立全脑缺血模型，研究了脑缺血/复灌后MKK7蛋白表达、激活、亚细胞分布及p-MKK7与JIP-1结合的规律；并研究了p-MKK7的重新分布及p-MKK7与JIP-1结合的调节。旨在探讨p-MKK7的重新分布在JNK信号通路中发挥的作用和机制。
1.脑缺血/复灌后海马MKK7在细胞中的表达、激活及p-MKK7的亚细胞分布。
采用SD大鼠四动脉结扎全脑缺血模型，以抗p-MKK7、MKK7抗体做免疫印迹，检测缺血15分钟复灌30分钟，1、3、6小时，1天后海马CA1和DG区胞浆和胞核中MKK7表达与激活的变化规律，结果显示：在DG区无论胞浆还是胞核MKK7的表达与激活都保持不变。而在CA1区，MKK7在胞核里快速激活(复灌10分钟)，之后p-MKK7由胞核转位到胞浆。在胞核中MKK7的表达与激活出现了两个峰，复灌10分钟和复灌6小时。在胞浆中表达与磷酸化水平也出现了两个峰，即复灌30分钟和复灌1天。免疫组化结果也显示：正常海马中p-MKK7主要分布于各区的神经细胞中(即CA1和CA3区的锥体细胞和DG区的颗粒细胞)，缺血复灌10分钟后，MKK7主要在CA1锥体细胞中激活，而CA3/DG区神经细胞中活性很低。复灌10分钟p-MKK7主要分布胞浆和胞核，而在复灌30分钟主要分布在胞浆内。结果表明，缺血/复灌早期MKK7在CA1区被激活并发生从胞核向胞浆的快速转位。
2.脑缺血/复灌后海马支架蛋白ЛP-1亚细胞分布及p-MKK7与ЛP-1的共结合。
用抗JIP-1的特异性抗体，采用免疫组化方法检测JIP-1的亚细胞分布。结果显示：与对照组相比，在复灌30分钟JIP-1亚细胞分布发生了明显的改变，主要集中在核周区。采用免疫沉淀的方法以抗p-MKK7抗体作免疫沉淀，抗JIP-1的抗体免疫印迹分析，或以JIP-1的抗体作免疫沉淀，抗p-MKK7抗体作免疫印迹分析，发现二者可免疫共沉淀。结果提示，脑缺血诱导的JIP-1和p-MKK7的亚细胞分布的改变有利于胞浆中JIP-1与MKK7/JNK形成信号模块并且激活JNK信号通路。
3.NAC对早期复灌过程中MKK7的表达、激活及其重新分布的调节作用
为了研究抗氧化剂NAC是否参与MKK7的激活、转位，运用免疫印迹方法检测到在复灌30分钟NAC能显著抑制胞浆MKK7的蛋白表达及激活。免疫组化显示：在复灌30分钟NAC能明显抑制p-MKK7的转位。由此可见，脑缺A/复灌早期诱导的MKK7的激活，转位和氧自由基的产生有关。
4.NAC对早期复灌过程中ЛP-1与p-MKK7之间相互作用的调节作用我们采用了免疫共沉淀方法检测NAC是否在JIP-1与p-MKK7结合中发挥作用。结果显示，在复灌30分钟NAC能明显抑制胞浆JIP-1与p-MKK7的共结合。由此可见，JIP-1与p-MKK7的共结合和氧自由基的产生有关。
综上所述，我们得出结论，脑缺血/复灌能够诱导MKK7激活，转位及其与JIP-1的结合，NAC能明显抑制上述过程。结果提示，复灌早期发生的MKK7的激活和转位可能在脑缺血诱导JNK信号通路的激活中发挥重要作用。